艾美耳球虫E.praecox减毒株选育及生物学特性、免疫原性评价

摘要

[目的]本研究基于球虫早熟选育的毒力衰减机制，通过鸡体传代早熟选育技术获得E. praecox减毒株，系统解析其生物学特性变异规律，量化评价不同免疫剂量的免疫原性差异，旨在为E. praecox特异性疫苗的研发提供候选虫株与技术参数。[方法]以临床分离的E. praecox-SX2025株（简称Psx）为亲本株，经鸡体连续传代早熟选育，通过粪便卵囊计数与潜隐期精准监测，定向选育遗传稳定的减毒株（简称PPrsx），鉴定其潜隐期、排卵囊高峰期及繁殖能力。14日龄雏鸡分别以0.1×104～5.0×104个卵囊/只的剂量口服PPrsx，以7 dpi平均增重、肠道病变评分（Johnson-Mattocks标准）评估致病性。4日龄雏鸡口服50～500个卵囊/只进行单次免疫，14 dpi时用5×10～4个卵囊/只的Psx攻击，通过相对增重率、卵囊减少率双指标量化评价免疫保护效果。[结果]Psx经16代选育获得遗传稳定的PPrsx，潜隐期较亲本株显著缩短13 h(P<0.05)，排卵囊高峰期从5 dpi提前至4 dpi，繁殖能力降低30.2%(P<0.05)，符合减毒株生物学特性筛选标准。致病性试验中，PPrsx各剂量组7 dpi时平均增重与空白对照组无显著差异（P>0.05），肠道黏膜无充血、出血等病理性损伤。PPrsx免疫剂量与保护效果呈正相关，300～500个卵囊/只剂量组免疫后，雏鸡相对增重率>95%，卵囊减少率≥76%，显著优于50～200个卵囊/只剂量组（P<0.05），且全程无精神沉郁、食欲减退等临床症状。[结论]本研究通过定向早熟选育技术成功获得了E. praecox减毒株PPrsx，该毒株通过潜隐期缩短、繁殖能力适度降低实现毒力衰减，且在300～500个卵囊/只剂量下可诱导雏鸡产生高效特异性免疫保护，兼具优异的安全性与免疫原性，为E. praecox疫苗的研发提供了优质候选虫株，同时明确了关键免疫参数，为后续疫苗产业化应用奠定理论基础。

关键词

早熟艾美耳球虫 / 减毒株 / 生物学特性 / 免疫原性