甜菜BvNAC40基因克隆、表达模式分析与载体构建

范梓奇, 孙亚卿, 李宁宁, 张少英, 李国龙

doi:10.13207/j.cnki.jnwafu.2025.12.004

西北农林科技大学学报（自然科学版） ›› 2025, Vol. 53 ›› Issue (12) : 1 -9. DOI: 10.13207/j.cnki.jnwafu.2025.12.004

甜菜BvNAC40基因克隆、表达模式分析与载体构建

范梓奇, 孙亚卿, 李宁宁, 张少英, 李国龙

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摘要

【目的】NAC转录因子在植物抵御逆境胁迫中作用显著。从抗旱甜菜品种‘HI0466’中克隆了NAC转录因子基因BvNAC40,分析其蛋白结构及干旱胁迫下的表达模式,为后续深入解析BvNAC40基因的抗旱功能及甜菜抗旱品种的选育提供理论依据。【方法】利用PCR技术克隆BvNAC40基因,并通过生物信息学分析其蛋白结构,利用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术进行亚细胞定位研究。利用RT-qPCR技术检测BvNAC40基因在干旱胁迫处理下的表达量。利用同源重组技术构建BvNAC40基因的过表达载体和基于烟草脆裂病毒的基因沉默载体。【结果】BvNAC40基因的CDS区序列全长1 182 bp,编码393个氨基酸,属于NAC转录因子家族,C端存在跨膜结构域,亚细胞定位显示其主要位于细胞核中。在干旱胁迫处理下,BvNAC40基因在甜菜叶片和根中均显著上调表达。【结论】BvNAC40基因在甜菜抗旱过程中特异表达,后续可以通过转基因技术研究其功能。