北苍术HDR基因克隆及表达分析

摘要

【目的】克隆北苍术1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-二磷酸还原酶基因(Ac HDR),探究其生物学特征和不同组织及盐胁迫下的表达模式,为研究Ac HDR功能提供理论依据。【方法】用RACE技术克隆Ac HDR基因,分析Ac HDR编码蛋白的理化性质、保守结构域、保守性及结构,构建系统发育树;用实时荧光定量PCR (RT-q PCR)技术检测Ac HDR在不同组织及100 mmol/L Na Cl胁迫处理不同时间下的表达量;测定不同盐胁迫下叶片的光合特性。【结果】Ac HDR(Gen Ban k登录号:PQ369427)开放阅读框全长为1 383 bp,编码460个氨基酸,具有lytB＿i sp H结构域,在进化过程中相对保守,与生菜、菊苣和橡胶草的HDR亲缘关系较近。RT-q PCR结果表明,Ac HDR在北苍术叶中表达量最高;在100 mmol/L Na Cl胁迫处理不同时间后,Ac HDR表达量呈现先升高后降低的趋势。150和250mmol/L Na Cl胁迫显著降低了北苍术光合特性。【结论】Ac HDR基因快速响应盐胁迫,可能会提高植物的耐盐性。

关键词

北苍术 / HDR / q RT-PCR / RACE技术