茯苓胞外三萜与甾醇分析及其抗氧化活性发掘

摘要

【目的】研究茯苓胞外三萜和胞外甾醇化合物的组成并分析其抗氧化活性,为茯苓菌株质量控制和抗氧化产品开发提供参考。【方法】以不同来源的FLA、FGD、FGZ、FHB、GTR1、GTR2、XJ28、F5.78等8个茯苓菌株为研究对象,利用广泛靶向代谢组学分析茯苓胞外三萜和胞外甾醇的化学成分,利用ABTS、DPPH、FRAP和OH模型分析各茯苓菌株发酵液的抗氧化能力,并利用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法判别分析和Pearson相关性分析,确定8个茯苓菌株胞外三萜和胞外甾醇的差异成分。【结果】从8个茯苓菌株中共定性检测出24种化合物,包括18种胞外三萜类化合物和6种胞外甾醇类化合物。其中GTR1菌株相对含量最高的三萜类成分是灵芝酸N,其他7个菌株相对含量最高的三萜类成分均为齐墩果酸甲酯,而菜油甾-4-烯-3β醇是8个菌株相对含量最高的甾醇类成分。GTR2菌株在ABTS、DPPH和FRAP模型中均显示出较强的抗氧化能力,而XJ28菌株在OH模型中显示出极强的抗氧化能力。正交偏最小二乘法判别分析发现,8个茯苓菌株的胞外三萜和胞外甾醇中存在10个差异组分,包括8个三萜类化合物和2个甾醇类化合物。Pearson相关性分析发现,ABTS、FRAP、DPPH模型分别与24,24,22种化合物峰面积相对含量呈负相关,而OH模型与12种化合物峰面积相对含量呈正相关。10个差异组分中,3-表熊果酸、去氢茯苓酸的相对含量与DPPH模型呈显著负相关(P<0.05),茯苓新酸B的相对含量与ABTS模型呈显著负相关(P<0.05),灵芝酸S、3β-羟基麦角甾-7,24(24(1))-二烯-4α-羧酸酯、4α-甲基-5α-麦角甾-8,14,24(28)-三烯-3β醇的相对含量与OH模型呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】不同茯苓菌株胞外三萜和胞外甾醇类化合物组成存在差异,3-表熊果酸、去氢茯苓酸、茯苓新酸B、灵芝酸S、3β-羟基麦角甾-7,24(24(1))-二烯-4α-羧酸酯、4α-甲基-5α-麦角甾-8,14,24(28)-三烯-3β醇是影响其抗氧化能力的关键成分。

关键词

茯苓 / 胞外三萜 / 胞外甾醇 / 广泛靶向代谢组学 / 抗氧化活性