茶梅花叶病病毒种类鉴定及多重PCR检测技术建立

摘要

【目的】明确引起茶梅（Camellia sasanqua）花叶病的病毒种类和主要病毒的全基因组序列，建立可靠的病毒分子检测技术，为茶梅病毒病的早期诊断和抗病毒育种提供参考。【方法】以2022年7月至2024年3月，采自陕西、浙江、福建和江苏地区具有黄化、褪绿、植株矮小等症状的茶梅叶片为材料，通过小RNA(sRNA)测序技术鉴定茶梅花叶病的病毒种类，并克隆病毒的全基因组序列，研究其分子变异情况。建立茶梅3种病毒一步法多重RT-PCR(mRT-PCR)快速诊断技术并进行优化。【结果】在表现花叶症状的茶梅叶片中检测到山茶环斑相关病毒3 (camellia ringspot-associated virus 3,CRSaV-3)、山茶黄化环斑病毒（camellia yellow ringspot virus,CaYRSV）和山茶乙型线形相关病毒3(camellia japonica associated metaflexid virus 3,CjBV-3)3种病毒。系统发育结果显示，茶梅3种病毒分子变异较小，但与来源于山茶花（C. japonica）的分离物相比，仍然存在较大的分子变异。建立了3种茶梅病毒一步法mRTPCR检测技术，该检测技术具有快速、高效、操作简便等优点。【结论】首次鉴定了茶梅花叶病的病毒种类，克隆获得3种茶梅病毒的11条全基因组序列，建立了茶梅病毒mRT-PCR检测技术，该技术具有快速、高效、操作简便等特点，可用于CRSaV-3、CaYRSV和CjBV-3的快速检测。

关键词

茶梅花叶病 / 病毒鉴定 / 多重RT-PCR(mRT-PCR