三参通脉合剂通过上调microRNA-146a改善大鼠心肌细胞H9C2的氧化损伤

摘要

目的 探讨三参通脉（Sanshentongmai, SSTM）合剂调节微小RNA-146a（microRNA-146a）对大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤的影响及作用机制。方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2，过氧化氢（H₂O₂）作为氧化剂制作H9C2氧化应激模型。通过三参通脉干预，观察H₂O₂诱导的H9C2细胞氧化损伤的变化以及microRNA-146a的表达，探讨三参通脉对H9C2的保护作用及其作用机制。将体外培养的H9C2分为空白组、H₂O₂氧化损伤模型组（简称模型组）、H₂O₂模型+三参通脉药物（500μg/mL，处理72 h）组（简称模型加药组）。通过细胞计数试剂盒CCK8检测细胞活力，酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）检测血清N端脑钠肽前体（N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NtproBNP）、一氧化氮（nitric oxide, NO）、超敏C反应蛋白（high-sensitivity C-reactive protein, Hs-CRP）和血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ）水平，实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测系统检测microRNA-146a表达水平。结果 通过CCK8法检测细胞活力，发现在药物质量浓度为500μg/mL时，细胞增殖改善达到顶峰，故选用此浓度为干预浓度。ELISA检测的心衰相关指标：Nt-proBNP、NO、Hs-CRP、angiotensinⅡ水平中，与空白组比较，模型加药物组中Nt-proBNP、angiotensinⅡ表达上调（P<0.05）,NO表达下调（P<0.05）,Hs-CRP与空白组比较表达差异无统计学意义，说明三参通脉可以有效改善大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤。最后，RT-PCR法检测microRNA-146a在各组的表达可以看出，15μmol/L H₂O₂处理可以明显降低microRNA-146a表达，而模型加药组中microRNA-146a表达较模型组升高（P<0.05），与空白组对比差异无统计学意义。结论 三参通脉可以明显抵抗H₂O₂诱导的H9C2细胞氧化损伤，可能是通过上调microRNA-146a从而发挥心肌保护作用。

关键词

大鼠心肌细胞H9C2 / 三参通脉合剂 / 氧化损伤 / 微小RNA-146a