INPP4B促进结直肠癌转移及其作用机制的初步探索

摘要

目的 明确肌醇多磷酸4-磷酸酶Ⅱ型（inositol polyphosphate-4-phosphatase typeⅡB,INPP4B）在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）中的表达及临床意义，明确CRC细胞中INPP4B与基质金属蛋白酶7（matrix metallopeptidase 7,MMP7）的关系，并初步探究INPP4B对CRC细胞的增殖、迁移的影响及机制。方法 使用TIMER2.0和GEPIA2数据库分析INPP4B在癌（瘤）和癌旁（瘤旁）组织中的表达差异和对CRC预后的影响；通过免疫组化检测临床手术切除的102例CRC肿瘤中INPP4B的表达，并分析INPP4B与临床病理指标的相关性；在过表达/敲减INPP4B的CRC细胞中，实时荧光定量PCR检测INPP4B和MMP7的基因表达，Western blot检测INPP4B蛋白表达，利用CellTiter 96?AQueous One检测细胞增殖，划痕实验、实时无标记动态细胞分析技术（RTCA）检测细胞迁移和侵袭；结合LinkedOmics数据库分析与INPP4B功能相关信号通路，并在细胞水平验证潜在的关键分子。结果 数据库分析结果显示，与正常组织相比（结肠癌：1.91，直肠癌：1.89），在CRC中INPP4B表达升高（结肠癌：2.30，直肠癌：2.33）。免疫组化检测临床肿瘤组织和肿瘤旁组织也证实INPP4B在CRC中表达增高（P<0.001）。Cox回归模型分析显示INPP4B[风险比（HR）=1.457,95%置信区间（CI）:1.003～2.115]影响CRC预后，Kaplan–Meier曲线显示INPP4B高表达患者生存期短（P<0.05）；χ2检验分析INPP4B表达与临床病理指标，发现INPP4B的高表达与淋巴结转移（χ²=3.997,P=0.046）和神经浸润（χ²=8.511,P=0.004）相关。体外实验中，与对照组细胞相比，过表达INPP4B的CRC细胞增殖和迁移能力增加（P<0.05）。通过LinkedOmics数据库分析显示INPP4B与细胞外基质重塑和细胞转移相关；Pearson相关性分析显示MMP7与INPP4B正相关（r=0.378 2,P<0.001）；体外过表达或敲减INPP4B后MMP7表达水平也随之升高和下降。结论 INPP4B在结直肠肿瘤组织中呈高表达并与淋巴结转移、神经浸润、患者预后相关。MMP7可能介导了INPP4B促进CRC细胞迁移和侵袭的作用。

关键词

肌醇多磷酸4-磷酸酶Ⅱ型 / 结直肠癌 / 基质金属蛋白酶7

基金资助

国家自然科学基金（No.82173104、No.81871233）资助