电离辐射对肠道胆汁酸代谢的影响：甘氨熊脱氧胆酸辐射防护作用机制的探索

摘要

目的 放射性肠道损伤是肿瘤放射治疗过程中常见并发症，本研究旨在观察电离辐射对肠道胆汁酸短期变化的影响，并探索胆汁酸对肠道细胞辐射防护作用。方法 采用腹部每日照射2 Gy，连续照射4 d射线构建大鼠小肠损伤模型，并运用代谢组学技术对胆汁酸进行定量分析。将小肠上皮细胞IEC-6分为二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）对照组（DMSO+0 Gy）、甘氨熊脱氧胆酸（glycoursodeoxycholic acid,GUDCA）实验组（GUDCA+0 Gy）、DMSO辐照组（DMSO+10 Gy）、GUDCA辐照组（GUDCA+10 Gy）。用CCK-8法检测细胞的存活率和细胞毒性；采用流式细胞术检测细胞的凋亡率；通过平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率以及放射敏感性；利用Western blot检测与细胞死亡相关的蛋白表达水平。结果 大鼠小肠组织辐照后均出现典型放射性肠损伤表现，多种胆汁酸在辐照前后发生波动，其中GUDCA在辐照后3 d显著升高，而在辐照后7 d恢复至辐照前水平；与对照组相比较，20μmol/L GUDCA作用24 h，辐照后细胞存活率高于DMSO组（P<0.05）;PARP、caspase-3、RIP、GSDMD蛋白表达量明显低于对照组（P<0.05）;20μmol/L GUDCA作用24 h、48 h，辐照后细胞凋亡率低于DMSO组（P<0.05）；与DMSO对照组相比，GUDCA实验组在0、2、4和6 Gy剂量辐照下克隆形成能力均强于DMSO组（P<0.05）,GUDCA组平均致死量D0为6.374,DMSO组平均致死量D0为4.572，与DMSO对照组相比，GUDCA药物组的D₀值增大，SER为0.717。结论 辐照大鼠腹部后，大鼠肠道胆汁酸代谢会产生显著变化，GUDCA可在一定程度上对肠道细胞产生辐射防护作用。

关键词

放射性肠炎 / 胆汁酸 / 甘氨熊脱氧胆酸 / 凋亡 / 辐射防护

基金资助

四川省科技计划项目（No.2022NSFSC0797、No.2023NSFSC0648）;; 江苏省卫健委重点科研项目（No.ZD2021053）及面上项目（No.H2023027）;; 无锡市“太湖人才计划”优秀医学专家团队（No.2021-9）;; 江阴市“暨阳名医”消化内镜领航专家团队（No.2023-37）;; 江阴市卫健委中青年后备拔尖人才计划（No.JYOYT202307）资助