circ＿0084043/miR-31-5p调节HMGA1参与动脉粥样硬化作用的机制研究

摘要

目的 探究circ＿0084043/miR-31-5p调节HMGA1参与动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）作用的具体机制。方法 收集2020年9月–2023年9月49例AS患者的颈动脉斑块及血管组织与对应斑块旁正常组织，qRT-PCR检测circ＿0084043、miR-31-5p和HMGA1表达。通过CCK-8、克隆形成、划痕、Transwell实验检测氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL）诱导人血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）增殖、迁移、侵袭能力，通过生物信息学、双荧光素酶报告基因检测验证circ＿0084043、miR-31-5p、HMGA1之间的靶向调节关系。建立AS小鼠模型，通过油红O、HE染色观察主动脉病变情况，生化检测静脉血血脂指标，qRT-PCR检测miR-31-5p、HMGA1表达情况，免疫组化检测主动脉HMGA1、α-SMA表达情况。结果 AS患者斑块、病变血管组织circ＿0084043、HMGA1表达水平升高（P<0.05）,miR-31-5p表达水平下降（P<0.05）。circ＿0084043与miR-31-5p表达水平呈负相关（r=-0.385 5,P=0.006 2）,HMGA1与circ＿0084043表达水平呈正相关（r=0.331 7,P=0.019 9），与miR-31-5p表达水平呈负相关（r=-0.335 1,P=0.018 6）。miR-31-5p与circ＿0084043、HMGA1存在靶向结合位点。与对照组相比，sh-NC组、scramble组、circ＿0084043+miR-31-5p mimics组、miR-31-5p inhibitor+sh-HMGA1组、circ＿0084043+sh-HMGA1组增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力升高（P<0.05）；与sh-NC组相比，sh-0084043组则降低（P<0.05）;miR-31-5p mimics组、sh-HMGA1组较scramble组增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力下降（P<0.05）。与sh-NC组相比，sh-0084043组主动脉脂质斑块、坏死核心面积减小（P<0.05）,TC、TG、LDL-C、HMGA1 mRNA及蛋白、α-SMA表达水平下降（P<0.05）,HDL-C、miR-31-5p表达水平上升（P<0.05）。结论 circ＿0084043通过抑制miR-31-5p提高HMGA1表达促进VSMCs增殖、迁移，推动AS进展。

关键词

circ＿0084043 / miR-31-5p / 高迁移率族蛋白A1 / 动脉粥样硬化 / 血管平滑肌细胞

基金资助

宁夏医科大学2021年校级科研项目（No.XM2021001）资助