氢溴酸樟柳碱对血管性痴呆模型大鼠的神经保护作用及其抗氧化应激机制研究

摘要

目的 血管性痴呆（VD）是一种常见的与脑血管疾病相关的认知功能障碍。本研究旨在探究氢溴酸樟柳碱（AH）对VD的治疗效果及其潜在的抗氧化应激机制。方法 通过永久性双侧颈总动脉闭塞法在SD大鼠上建立VD模型，并分为假手术组、VD组和不同剂量的AH治疗组（n=4）。利用Bederson评分法评估各组大鼠的神经功能，并结合爬杆试验分析各组大鼠的肢体协调能力。采用酶联免疫吸附法测定血清和大脑中的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量，以评估氧化应激水平。此外，通过TUNEL实验评估细胞凋亡情况，使用DCFH-DA探针检测神经细胞的活性氧（ROS）水平。使用M1-M5抑制剂，探究AH对M受体的可能作用机制。结果 与假手术组相比，VD组大鼠神经功能与肢体协调能力受损（P<0.01），血清和大脑中的SOD活性降低[血清：（100.70±18.95） U/mL vs.(44.22±7.11) U/mL,P<0.001；大脑：（131.77±8.34） U/mg vs.(84.39±4.10) U/mg,P<0.01]，MDA浓度升高[血清：（12.03±1.01） nmol//m L vs.(17.74±1.00) nmol//m L,P<0.001；大脑：（4.41±0.30） nmol/mg vs.(6.17±0.70) nmol/mg,P<0.05]。AH治疗能够改善VD大鼠的神经功能与肢体协调能力，特别是高剂量AH治疗组与VD组相比，SOD活性提高[血清：（44.22±7.11） U/mL vs.(98.67±0.86) U/mL,P<0.001；大脑：（84.39±4.10） U/mg vs.(162.83±17.36) U/mg,P<0.001]和MDA浓度降低[血清：（17.74±1.00） nmol/mL vs.(6.68±0.06) nmol/mL,P<0.001；大脑：（6.17±0.70） nmol/mg vs.(3.96±0.77) nmol/mg,P<0.01]效果最为显著。AH治疗还减少了TUNEL阳性细胞数量（P<0.01），并呈剂量依赖性，AH浓度从低到高时凋亡细胞占比分别为（36.10±9.07）%、（9.60±5.63）%、（3.43±0.92）%，表明其对细胞凋亡具有抑制作用。在体外实验中，AH处理能够降低HT22和NSC-34细胞的MDA浓度（P<0.01），提高SOD活性（P<0.01），并降低ROS水平，呈现剂量依赖性。M2受体抑制剂可以降低氧化应激损伤中的ROS水平，提示AH作为M受体拮抗剂，可能通过抑制M2受体发挥作用。结论 氢溴酸樟柳碱通过调节SOD和MDA水平，减轻氧化应激损伤，改善神经功能和肢体协调能力，对VD具有潜在的治疗效果。AH的神经保护作用可能与其抗氧化应激和抗凋亡机制有关，且M2受体可能是其作用的关键靶点。这些结果为VD治疗新策略开发提供了重要的理论基础。

关键词

血管性痴呆 / 樟柳碱 / 氧化应激 / 超氧化物歧化酶 / 丙二醛 / M受体