牙龈卟啉单胞菌诱导口腔鳞状细胞癌免疫抑制微环境形成的机制研究

摘要

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis, P.g）在口腔鳞状细胞癌肿瘤微环境中的作用，从而为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的思路。方法 体外培养鼠源性鳞状细胞癌细胞系SCC7，构建C57BL/6小鼠荷瘤模型。实验小鼠按照随机对照原则分为P.g激活组与对照组，每组各5只，饲养16 d以后处死，记录两组小鼠瘤体质量与体积。采用免疫组织化学技术分析瘤体组织中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、转化生长因子β（transforming growth factor-β, TGF-β）、白细胞介素10（interleukin-10, IL-10）、干扰素-γ（interferon-γ, IFN-γ）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、Twist、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）、CD31、Ki67表达水平。使用流式细胞术对两组实验小鼠的肿瘤样本进行检测，量化分析样本中的CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞以及CD69⁺、CD103⁺T淋巴细胞的比例差异。结果 免疫组化结果显示，激活组小鼠瘤体组织中CD4⁺T细胞及与其功能相关细胞因子与对照组相比表达较高，且差异均有统计学意义（P<0.05）。流式细胞术结果表明，激活组小鼠瘤体组织内CD8⁺T细胞所占比例下降，且发挥抗肿瘤免疫作用的CD103⁺CD8⁺T细胞比例下降，与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。此外，激活组肿瘤恶性表型相关细胞因子表达均升高，与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 P.g通过增强口腔鳞状细胞癌肿瘤微环境CD4⁺T细胞浸润并且抑制CD8⁺T细胞的免疫抑制功能，致使肿瘤细胞免疫逃逸，加速了肿瘤细胞上皮-间充质转化现象、成血管现象以及肿瘤细胞增殖。

关键词

口腔鳞状细胞癌 / 牙龈卟啉单胞菌 / 免疫抑制微环境 / 肿瘤恶性生物学行为

基金资助

国家自然科学基金(No.82460524); 新疆维吾尔自治区自然科学基金-杰出青年科学基金(No.2022D01E073)资助