基于网络药理学与体外实验探究黄伞总黄酮抗阿尔茨海默病作用机制

摘要

目的 探究真菌黄伞（Pholiota adiposa）总黄酮通过线粒体途径干预阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）的潜在机制。方法 运用代谢组学分析黄伞中的总黄酮活性成分；多种数据库筛选黄伞总黄酮与AD的交集靶点，构建蛋白质-蛋白质相互作用网络以确定核心靶点，开展京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）通路富集；采用分子对接技术验证活性成分与核心靶点的结合能力；体外实验检测总黄酮的抗氧化效能以及羟自由基清除能力，评估总黄酮对小鼠小胶质细胞增殖能力的影响，通过实时荧光定量PCR法检测M1型小胶质细胞标志物诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,INOS）和分化簇86分子（cluster of differentiation 86,CD86）的mRNA表达情况。结果 鉴定出黄伞含有19种总黄酮活性成分，筛选得到总黄酮活性成分与AD共149个交集靶点，确定核因子κB亚基1（nuclear factor kappa B Subunit 1,NFKB1）、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1（AKT serine/threonine kinase 1,AKT1）等10个核心靶点，主要富集于线粒体功能相关信号通路。分子对接显示淫羊藿苷等成分与核心靶点结合良好。体外实验表明，黄伞总黄酮在不同浓度梯度下分别表现出总抗氧化能力和羟自由基清除能力的剂量依赖性增强（P<0.001），黄伞总黄酮能促进BV2细胞增殖并下调Aβ_25-35诱导的BV2细胞中INOS和CD86的表达（P<0.001）。结论 黄伞总黄酮可通过多靶点和多通路机制，特别是线粒体途径干预AD，发挥神经保护作用。

关键词

真菌黄伞 / 总黄酮 / 阿尔茨海默病 / 网络药理学 / 分子对接 / 线粒体途径