Cathepsin B介导巨噬细胞M1极化调控人卵巢储备功能减退机制探讨

摘要

目的 研究组织蛋白酶B(Cathepsin B)对巨噬细胞极化的影响及对卵巢储备功能减退（diminished ovarian reserve,DOR）的作用及相关机制。方法 获取7例卵巢组织样本及对应患者血清，根据抗米勒管激素（antiMüllerian hormone,AMH）水平将样本分为正常组（n=3）及DOR组（n=4）。苏木素-伊红（haematoxylin-eosin,HE）染色、免疫组化和实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR）分析卵巢组织中的卵泡形态、Cathepsin B及巨噬细胞极化因子表达；qRT-PCR检测巨噬细胞M1极化后Cathepsin B表达的变化，敲低Cathepsin B后评估M1极化及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路的变化；qRT-PCR及细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）检测巨噬细胞与人卵巢颗粒细胞（KGN）共培养后的颗粒细胞凋亡及增殖情况。结果 与正常组相比，DOR组卵巢组织中生长卵泡较少、闭锁卵泡较多，Cathepsin B、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α,TNF-α)及诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的表达显著升高。巨噬细胞M1极化状态高表达Cathepsin B，敲低Cathepsin B后，M1极化因子及NF-κB通路相关因子表达均显著下降。巨噬细胞M1极化促进KGN细胞凋亡，并抑制其增殖。结论 DOR患者卵巢组织中Cathepsin B的表达显著上调，且M1型巨噬细胞浸润明显。Cathepsin B可能通过靶向NF-κB信号转导通路促进巨噬细胞M1极化。巨噬细胞M1极化可促进人卵巢颗粒细胞的凋亡，抑制其增殖。

关键词

卵巢储备功能减退 / 组织蛋白酶B / 巨噬细胞极化 / 卵巢颗粒细胞 / NF-κB通路