新型铁死亡抑制剂α-硫辛酸衍生物在脊髓损伤中的治疗作用

Therapeutic effects of a novel ferroptosis inhibitor α-lipoic acid derivative in spinal cord injury

摘要

目的 设计并合成兼具抗铁死亡和抗炎双重活性的新型α-硫辛酸衍生物N-（10H-吩噻嗪-2-基甲基）-5-（（R）-1，2-二硫戊环-3-基）戊酰胺（A2），研究其对SD大鼠脊髓损伤（spinal cord injury， SCI）模型的神经保护效果，并验证其体内外安全性。 方法 设计并合成A2，利用氢谱、碳谱及高分辨质谱确证其结构。采用DPPH清除实验和Fe²⁺螯合实验分别检测其自由基清除能力与铁螯合能力。通过CCK-8法和Griess法分别评估A2对Erastin诱导的PC12细胞铁死亡及脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）诱导的PC12细胞炎症的抑制作用，比色法测定细胞及脊髓组织内MAD与Fe²⁺含量。采用BBB评分评价SCI大鼠后肢运动功能恢复，HE染色观察脊髓组织的病理学变化。通过CCK-8法检测A2在PC12、BV2、HepG2及HK2细胞中的安全性，观察BALB/c小鼠心、肝、脾、肺、肾的HE染色，比色法检测肝肾功能指标。 结果 A2具有显著的抗铁死亡活性，可逆转Erastin诱导的PC12细胞内Fe²⁺及MDA水平升高，并抑制LPS诱导的IL-6与TNF-α水平升高。与模型组相比，A2给药组的BBB评分显著提高（P<0.01），脊髓组织损伤减轻，组织中Fe²⁺、MDA、IL-6及TNF-α含量均显著降低。A2浓度≤40 μmol/L时对PC12、BV2、HepG2及HK2细胞无明显毒性；小鼠体内耐受性良好，250 mg/kg剂量下未见明显异常。 结论 化合物A2兼具抗铁死亡与抗炎活性，体内外毒性较低，具备治疗SCI的潜在应用价值。

Abstract

Objective To design and synthesize a novel α-lipoic acid derivative N-（（10H-phenothiazin-2-yl）methyl）-5-（（R）-1，2-dithiolan-3-yl）pentanamide （A2） with dual anti-ferroptosis and anti-inflammatory activities， and to evaluate its neuroprotective efficacy in the spinal cord injury （SCI） model of SD rats and to validate its safety in vitro and in vivo. Methods The target compound A2 was designed and synthesized， with its structure confirmed by hydrogen spectrum， carbon spectrum， and high-resolution mass spectrometry. Its free radical scavenging capacity and iron chelation ability were evaluated using DPPH scavenging experiments and Fe²⁺ chelation experiments， respectively. The inhibitory effects of A2 on erastin-induced ferroptosis in PC12 cells and lipopolysaccharide-induced inflammation in PC12 cells were assessed via the CCK-8 assay and Griess method， respectively. The levels of MDA and Fe²⁺ in cells and spinal cord tissues were determined by colorimetry. The recovery of hindlimb motor function in SCI rats was evaluated using the BBB scores， while pathological changes in spinal cord tissues were observed via hematoxylin-eosin （HE） staining. The safety of A2 in PC12， BV2， HepG2， and HK2 cells was assessed using the CCK-8 assay. HE staining was performed on the heart， liver， spleen， lung， and kidney of BALB/c mice， and liver and kidney function indicators were measured by colorimetry. Results A2 exhibits significant anti-ferroptosis activity， reversing the elevation of Fe²⁺ and MDA levels induced by erastin in PC12 cells， as well as the increase in IL-6 and TNF-α levels induced by LPS in PC12 cells. Compared with the model group， the BBB score in the A2-treated group was significantly improved （P<0.01）， with reduced spinal cord tissue damage and markedly decreased levels of Fe²⁺， MDA， interleukin-6 （IL-6） and tumor necrosis factor-α （TNF-α） in the spinal cord tissue. A2 concentrations ≤40 μmol/L showed no significant toxicity to PC12， BV2， HepG2， and HK2 cells. It also demonstrated good tolerability in mice， with no apparent abnormalities observed at a dose of 250 mg/kg. Conclusion Compound A2 exhibits both anti-ferroptosis and anti-inflammatory activities， with low toxicity in vitro and in vivo， holding potential therapeutic value for SCI.

Graphical abstract

关键词

铁死亡抑制剂 / α-硫辛酸衍生物 / 脊髓损伤 / 神经保护

Key words

Ferroptosis inhibitor / α-Lipoic acid derivative / Spinal cord injury / Neuroprotection

脊髓损伤（spinal cord injury， SCI）是一种高致残率与病死率的神经系统疾病^［1］，其病理生理学进程分为原发性损伤与继发性损伤^［2］。继发性损伤涉及氧化应激、炎症反应及多种程序性细胞死亡，显著加重神经功能损害^［3-4］。目前SCI干预手段包括手术、药物及康复治疗^［5］，但现有药物疗效有限，如甲泼尼龙治疗时间窗窄且不良反应显著^［6-7］。因此，寻找更为安全有效的治疗药物具有重要意义。

铁死亡是一种铁依赖性的程序性细胞死亡形式，其核心特征为铁过载与脂质过氧化^［8］。SCI后铁代谢紊乱，蓄积的铁离子通过芬顿反应产生大量活性氧，引发脂质过氧化链式反应导致细胞铁死亡^［9-10］，并与炎症相互促进^［11］。因此，开发靶向铁死亡与炎症的多靶点药物，可能为SCI治疗提供更有效的策略。

α-硫辛酸是临床应用的天然抗氧化剂，具有清除自由基、螯合金属离子及抗炎等作用^［12-13］，可抑制铁死亡但效果有限^［14］。因此，保留其抗炎活性的同时增强抗铁死亡效能是研究的关键。

本课题组前期发现吩噻嗪衍生物具有较强的抗铁死亡活性^［15］。基于此，本研究采用多靶点策略，将α-硫辛酸与吩噻嗪片段杂合，构建新型衍生物N-（10H-吩噻嗪-2-基甲基）-5-（（R）-1，2-二硫戊环-3-基）戊酰胺（A2），通过体外模型评估其对铁死亡和炎症的抑制作用，并在大鼠SCI模型中验证其神经保护效果，以期为SCI的治疗开发新的候选药物。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

2-氰基吩噻嗪（C184209）、氢化铝锂（L112997）、四氢呋喃（THF，T120775）、α-硫辛酸（T106640）、N，N'-二环己基碳酰亚胺（DCC，D432856）、N-羟基琥珀酰亚胺（NHS，H109330）、1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH，D1501121）、二甲亚砜（DMSO，D103271）、氯化亚铁（FeCl₂，I433954）及甲泼尼龙（M420133）均购自上海阿拉丁公司；薄层色谱板及柱色谱硅胶购自青岛邦凯公司；二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯购自成都科隆公司。Erastin（HY-15763）、Ferrostatin-1（Fer-1，HY-100579）、菲洛嗪（HY-137805）、去铁胺（DFO，HY-B1625）、乙二胺四乙酸（EDTA，HY-Y0682）购自MedChemExpress；脂多糖（LPS，L6529）购自Sigma-Aldrich；过氧化氢（H₂O₂，10011218）购自国药集团。大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12（SNL-124）、小鼠胶质细胞BV2（SNL-155）、人肝癌细胞HepG2（SNL-083）及人肾近曲小管上皮细胞HK2细胞（SNL-165）购自武汉尚恩生物公司；DMEM高糖培养基、胎牛血清、青霉素-链霉素双抗溶液购自上海逍鹏生物公司（C3113，C04001，C3421）。一氧化氮（NO，S0021）、丙二醛（malondialdehyde， MDA，S0131）、亚铁离子（Fe²⁺，S1068）检测试剂盒，白细胞介素-6（interleukin-6， IL-6，PI328，PI326）与肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α， TNF-α，PT516，PT513）的酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒、苏木精-伊红染色试剂盒（hematoxylin-eosinstaing， HE，C0105）、尿素氮（BUN，S0574）、肌酐（SCR，S0291）、丙氨酸氨基转移酶（ALT，P2715）、天冬氨酸氨基转移酶（AST，P2711）活性检测试剂盒及吐温-80（ST2789）均购自上海碧云天生物公司。紫外分析仪（齐威ZF-1）、旋转蒸发仪（DLAB RE100）、核磁共振波谱仪（Bruker AV-400，400/101 MHz）、高分辨质谱仪（Bruker TOF-Q）、显微熔点测定仪（浙江捷宸）及多功能酶标仪（MD SpectraMax 190）。

1.2 化合物A2的合成

将2-氰基吩噻嗪（224.28 mg，1 mmol，1 eq）溶于THF，缓慢滴加至含氢化铝锂（265.65 mg，7 mmol，7 eq）的THF溶液中，室温搅拌反应4 h。通过薄层色谱（TLC）监测确认反应完全后，缓慢滴加蒸馏水淬灭反应；反应液用二氯甲烷与饱和食盐水萃取，过滤，40℃水浴减压浓缩，得粗产物。粗产物经硅胶柱色谱（干法上样，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱）纯化，制得中间体A1。

另取α-硫辛酸（220.35 mg，1 mmol，1 eq）、DCC（206.33 mg，1 mmol，1 eq）与NHS（115.09 mg，1 mmol，1 eq）溶于适量THF中，室温反应24 h后，滴加含A1（182.65 mg，0.8 mmol，0.8 eq）的THF溶液，继续反应12 h。反应液经萃取、浓缩及硅胶柱色谱分离纯化后，得终产物A2。

1.3 DPPH自由基清除能力测定

将Fer-1（经典铁死亡抑制剂）、α-硫辛酸及A2分别溶于DMSO配成0.05 mmol/L溶液。取上述样品50 μL加入96孔板后，再加入等量DPPH溶液（甲醇配制，0.05 mmol/L），混匀后于室温避光孵育10 min后，使用酶标仪在517 nm波长处测定吸光度。

1.4 铁螯合能力检测

将H₂O₂（氧化剂）、EDTA（金属离子螯合剂）、DFO（铁螯合剂）、Fer-1（铁死亡抑制剂）、α-硫辛酸及A2分别以DMSO配成10 mmol/L母液。菲洛嗪（铁离子螯合剂）及FeCl₂用纯水配制。取1 μL待测物、5 μL FeCl₂溶液（1 mmol/L）、20 μL菲洛嗪溶液（5 mmol/L），加纯水至总体积100 μL，混匀后转移至96孔板，室温反应后于562 nm处测定吸光度。

1.5 细胞实验

1.5.1 Erastin诱导PC12铁死亡模型制备

PC12细胞培养于含10%胎牛血清、100 U/mL青链双抗的DMEM中，37℃、5% CO₂条件下传代。

取对数生长期细胞以5×10³/孔接种96孔板，培养12 h后加入不同浓度的Erastin（0、2、4、6、8、10 μmol/L）处理24 h，CCK-8法检测细胞活力。后续实验分组：正常组、Erastin（5 μmol/L）组、Erastin+溶剂对照（DMSO）组、Erastin+α-硫辛酸（1 μmol/L）、Erastin+A2（1 μmol/L）组及Erastin+Fer-1（1 μmol/L）组。

1.5.2 LPS诱导PC12炎症模型建立

同上方法接种PC12细胞，培养12 h后加入不同浓度的LPS（0、25、50、100、200、300、400、500、1 000、2 000、4 000 ng/mL）处理24 h，取培养上清按NO试剂盒说明书操作，于540 nm测定吸光度。实验分组：正常组、LPS（1000 ng/mL）组、LPS+溶剂对照（DMSO）组、LPS+α-硫辛酸（10 μmol/L）组、LPS+A2（10 μmol/L）及LPS+甲泼尼龙组。

1.5.3 细胞MDA与Fe²⁺含量测定

收集各组细胞（约5×10⁶个），按相应试剂盒说明书操作，分别测定532/600 nm（MDA）和562 nm（Fe²⁺）处吸光度。

1.5.4 细胞IL-6与TNF-α含量检测

收集LPS炎症模型各组细胞的培养上清，按相应ELISA试剂盒说明书操作，于450 nm处测定吸光度。

1.6 动物实验

1.6.1 大鼠SCI模型构建

SPF级雌性SD大鼠（200~230 g）及雄性BALB/c小鼠（18~22 g）购自西安交通大学［许可证号：SA2XK（陕）2018-001、SA2XK（陕）2021-004］。实验经延安大学附属医院伦理委员会批准。

适应饲养1周后，将大鼠随机分为5组：假手术组（仅椎板切除）、模型组（SCI）、SCI+溶剂对照组、SCI+α-硫辛酸组及SCI+A2组。除假手术组外，其余均采用HI-0400打击器建立脊髓损伤模型。给药组于术后每24 h尾静脉注射相应药物（5 mg/kg），溶剂对照组注射等体积溶剂（2.5%吐温-80、2.5%无水乙醇及95%生理盐水），模型组不作处理。

1.6.2 运动功能评价

连续给药28 d，于术后1、3、7、14、21、28 d采用双盲法进行Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分^［17］（0分=无运动，21分=正常）。

1.6.3 HE染色

给药28 d后取脊髓组织，4%多聚甲醛固定24~48 h，梯度脱水、石蜡包埋、切片（纵切）。切片脱蜡、水化后，按照HE试剂盒说明书染色，经梯度乙醇脱水、二甲苯透明、中性树胶封片后，于显微镜下观察。

1.6.4 组织MDA与Fe²⁺含量测定

连续给药3 d后收集血液及脊髓组织。血清按照MDA试剂盒操作说明测定532 nm/600 nm处吸光度；取0.1 g脊髓组织加入1 mL Fe²⁺提取液，冰浴匀浆，离心后取上清液，按照Fe²⁺试剂盒说明书进行操作，于562 nm处测定吸光度。

1.6.5 组织IL-6与TNF-α含量检测

连续给药3 d后，提取脊髓组织蛋白，按照IL-6和TNF-α ELISA试剂盒说明书操作，于450 nm处测定吸光度。

1.7 毒性评价

1.7.1 细胞毒性检测

取对数期PC12、BV2、HepG2及HK2细胞，以5×10³/孔接种96孔板，培养12 h后加入不同浓度的A2（0、5、10、20、40、80 μmol/L，DMSO终浓度<0.5%），继续培养24 h，CCK-8法测定细胞活力。

1.7.2 体内毒性评价

BALB/c小鼠随机分为对照组（生理盐水）、100 mg/kg A2组及250 mg/kg A2组，尾静脉注射给药（每12 h 1次，连续16 d），每2 d记录1次体重。末次给药后取心、肝、脾、肺、肾组织，4%多聚甲醛固定，蔗糖梯度脱水、OCT包埋、冰冻切片，HE染色后镜检。同时采集眼球血，离心分离血清，按相应试剂盒检测BUN、SCR、ALT及AST水平。

1.8 统计学方法

采用GraphPad Prism软件进行统计分析，所有数据均以（\overline{x}±s）表示。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）。与对照组比较，###表示P<0.001；与模型组比较，*表示P<0.05，**表示P<0.01，***表示P<0.001，****表示P<0.000 1，ns表示无显著性差异。

2 结果

2.1 化合物A2的合成与结构表征

2-氰基吩噻嗪与氢化铝锂反应生成中间体A1，A1进一步与α-硫辛酸缩合得目标化合物A2（路线1）。A2为棕黄色固体，产率为52%。其核磁共振氢谱（¹H NMR） （400 MHz， DMSO） δ 8.60 （s， 1H）， 8.27 （s， 1H）， 7.06~6.61 （m， 6H）， 4.10 （d， J=4.4 Hz， 2H）， 3.59 （s， 1H）， 3.13 （d， J=18.6 Hz， 2H）， 2.37 （s， 1H）， 2.13 （s， 2H）， 1.91~1.20 （m， 8H）；碳谱（¹³C NMR） （101 MHz， DMSO-d₆ ） δ 172.38， 142.54， 142.52， 139.87， 127.93， 126.65， 126.46， 122.17， 121.25， 116.92， 115.06， 114.90， 113.91， 56.60， 42.13， 40.36， 38.59， 35.69， 34.61， 28.82， 25.55；高分辨质谱（HRMS） m/z （ESI） calcd for C₂₁H₂₄N₂OS₃ ［M+H］⁺ 417.1124， found： 417.1116；熔点（m.p.） 210.4~210.6 ℃。

a：氢化铝锂，THF，4 h，室温；b：DCC，NHS，THF，36 h，室温。

路线1 化合物A2的合成路线

2.2 A2的体外自由基清除能力与Fe²⁺螯合活性评价

采用DPPH自由基清除实验评估各化合物的抗氧化活性，结果显示，Fer-1、α-硫辛酸及A2均能显著降低DPPH水平（图1A），表明A2具备良好的自由基清除能力。铁螯合实验结果显示，仅EDTA与DFO可有效地螯合Fe²⁺，H₂O₂、Fer-1、α-硫辛酸及A2均未表现出Fe²⁺螯合作用（图1B）。因此，A2与Fer-1类似，同属于自由基捕获类铁死亡抑制剂^［20］，而非铁螯合类抑制剂。

2.3 A2的抗铁死亡活性评价

采用Erastin（5 μmol/L）诱导PC12细胞构建铁死亡模型（半数抑制浓度IC₅₀=5 μmol/L，图2A），以评价A2的抗铁死亡作用。如图2B所示，1 μmol/L α-硫辛酸、A2及Fer-1处理组均能挽救Erastin所致的铁死亡，且A2的挽救作用强于Fer-1及α-硫辛酸，其半数有效浓度EC₅₀=94.3 nmol/L（表1）。由于铁死亡的核心特征为铁过载与脂质过氧化，本实验进一步检测了细胞内Fe²⁺含量（反映铁过载程度）和MDA水平（反映脂质过氧化程度）。结果显示A2组可显著降低Fe²⁺与MDA水平，效果同样优于α-硫辛酸与Fer-1组（图2C）。上述结果表明，A2对Erastin诱导的PC12细胞铁死亡具有显著的保护作用。

2.4 A2的抗炎活性评价

为评价A2的抗炎作用，本研究采用LPS（1 000 ng/mL）构建PC12细胞炎症模型（图3A）。如图3B所示，10 μmol/L A2对LPS诱导的NO释放的抑制效果优于α-硫辛酸及甲泼尼龙。同时，IL-6和TNF-α的ELISA检测结果显示，与LPS组相比，A2组的IL-6和TNF-α水平均显著降低，其效果同样优于α-硫辛酸组及甲泼尼龙组（图3C）。上述结果共同表明，A2能有效抑制LPS诱发的PC12细胞炎症反应。

2.5 A2在SD大鼠SCI模型中的治疗效果

采用SD大鼠SCI模型评价A2的体内疗效。术后连续给药28 d，BBB评分结果显示，自第7 d起，α-硫辛酸组与A2组的评分均显著高于SCI组，至第28 d时A2组评分优于α-硫辛酸组（图4A）。HE染色显示，假手术组脊髓结构完整，SCI组可见大量空洞及组织破坏，溶剂对照组表现与其一致；α-硫辛酸组与A2组空洞减少、结构相对完整，其中A2组恢复效果更佳（图4B）。

术后3 d检测脊髓组织中MDA及Fe²⁺含量，结果显示SCI组两者均显著升高，α-硫辛酸或A2处理后可显著降低其水平，且A2组效果优于α-硫辛酸组（图4C）。IL-6与TNF-α水平呈类似趋势：SCI组显著升高，给药组均有所降低，其中A2组效果最优（图4C）。综上表明，A2可能通过抑制铁死亡与炎症反应促进SCI后的神经功能恢复。

2.6 A2的体内外毒性评价

细胞毒性结果显示，当A2浓度≤40 μmol/L时对PC12、BV2、HepG2及HK2细胞无明显毒性（图5A）。体内毒性实验表明，A2（100、250 mg/kg）给药后各组小鼠体重变化无显著差异（图5B）；心、肝、脾、肺、肾组织HE染色未见明显病理学改变（图5C）；血清肝肾功能指标（BUN、SCR、ALT、AST）的组间差异亦无统计学意义（图5D），提示A2在250 mg/kg的剂量下仍具有良好的体内耐受性。综上，A2在体内外均呈现低毒特性。

3 讨论

SCI的治疗始终面临挑战，甲泼尼龙、手术减压等现有手段因其继发性损伤机制复杂而疗效有限^［5-6］。铁死亡作为近年来被证实与SCI相关的细胞死亡方式，其特征为铁离子蓄积和脂质过氧化^［10］；而炎症反应贯穿SCI全程，与铁死亡相互促进，形成恶性循环^［11］。因此，同时干预这两个病理学过程，有望打破该循环。

α-硫辛酸虽具备抗氧化与抗炎活性，但其铁死亡抑制能力较弱，限制了其在SCI中的应用^［14］。本课题组前期发现吩噻嗪核心片段具有良好的铁死亡抑制效果，但抗炎作用不足^［15-16］。基于此，本研究将二者结合得到了新型α-硫辛酸衍生物A2。体外结果显示，A2的抗铁死亡活性较α-硫辛酸提升约300倍（EC₅₀=0.094 μmol/L），抑制LPS诱导的IL-6与TNF-α释放能力亦强于α-硫辛酸，体内实验进一步验证了这一双重优势，提示吩噻嗪片段的引入可能通过电子供体效应的累加，增强了其自由基捕获能力，进而协同抑制脂质过氧化^［18］。

与文献^［14］报道的α-硫辛酸相比，A2活性的提升印证了结构修饰的有效性；而与经典铁死亡抑制剂Fer-1^［19］相比，A2的优势在于其兼具抗炎活性，更契合SCI复杂的病理学微环境。值得注意的是，与部分吩噻嗪衍生物毒性较高的报道^［18］不同，本研究中A2在有效浓度范围内未见明显毒性，推测可能与吩噻嗪片段的引入改善了其药代动力学特性有关。

本研究尚存不足：A2的具体分子靶点有待明确，后续需通过表面等离子体共振等技术验证；抗炎活性评价中仅检测了TNF-α和IL-6这两种代表性促炎因子，未能全面涵盖IL-1β等其他关键炎症介质，且抗炎机制目前仅停留于表型检测，通路层面的深入探究尚未开展。上述问题将在后续研究中完善。

参考文献

[1] ANJUM A， YAZID M D， FAUZI DAUD M，et al. Spinal cord injury：Pathophysiology，multimolecular interactions，and underlying recovery mechanisms［J］. International Journal of Molecular Sciences，2020，21（20）：7533.

[2] WIDERSTRÖM-NOGA E. Neuropathic pain and spinal cord injury：Management，phenotypes，and biomarkers［J］. Drugs，2023，83（11）：1001-1025.

[3] JIN L Y， LI J， WANG K F，et al. Blood-spinal cord barrier in spinal cord injury：A review［J］. Journal of Neurotrauma，2021，38（9）：1203-1224.

[4] CHIO J C T， XU K J， POPOVICH P，et al. Neuroimmunological therapies for treating spinal cord injury：Evidence and future perspectives［J］. Experimental Neurology，2021，341：113704.

[5] HU X， XU W， REN Y L，et al. Spinal cord injury：Molecular mechanisms and therapeutic interventions［J］. Signal Transduction and Targeted Therapy，2023，8：245.

[6] BRACKEN M B. Administration of methylprednisolone for 24 or 48 hours or tirilazad mesylate for 48 hours in the treatment of acute spinal cord injury：Results of the third national acute spinal cord injury randomized controlled trial［J］. Jama，1997，277（20）：1597.

[7] ZHUANG Z， LI B， CAI C Y，et al. MMP-responsive nanodrug loaded with glibenclamide for targeted repair of acute spinal cord injury［J］. International Journal of Pharmaceutics，2025，675：125526.

[8] DIXON S J， LEMBERG K M， LAMPRECHT M R，et al. Ferroptosis：An iron-dependent form of nonapoptotic cell death［J］. Cell，2012，149（5）：1060-1072.

[9] LEE J， ROH J L. Ferroptosis：Iron release mechanisms in the bioenergetic process［J］. Cancer and Metastasis Reviews，2025，44：36.

[10] SHEN W Y， LI C H， LIU Q，et al. Celastrol inhibits oligodendrocyte and neuron ferroptosis to promote spinal cord injury recovery［J］. Phytomedicine，2024，128：155380.

[11] FREYERMUTH-TRUJILLO X， SEGURA-URIBE J J， SALGADO-CEBALLOS H，et al. Inflammation：A target for treatment in spinal cord injury［J］. Cells，2022，11（17）：2692.

[12] CAPECE U， MOFFA S， IMPROTA I，et al. Alpha-lipoic acid and glucose metabolism：A comprehensive update on biochemical and therapeutic features［J］. Nutrients，2023，15（1）：18.

[13] BOSSIO S， PERRI A， GALLO R，et al. Alpha-lipoic acid reduces cell growth，inhibits autophagy，and counteracts prostate cancer cell migration and invasion：Evidence from in vitro studies［J］. International Journal of Molecular Sciences，2023，24（23）：17111.

[14] ZHAO Y F， LIU X Y， LIANG C，et al. α-lipoic acid alleviated fluoride-induced hepatocyte injury via inhibiting ferroptosis［J］. Journal of Agricultural and Food Chemistry，2022，70（50）：15962-15971.

[15] BAI X Y， YANG Y L， LUO Y L，et al. Design and synthesis of sulfonamide phenothiazine derivatives as novel ferroptosis inhibitors and their therapeutic effects in spinal cord injury［J］. Bioorganic Chemistry，2024，148：107458.

[16] YANG W， LIU X L， SONG C L，et al. Structure-activity relationship studies of phenothiazine derivatives as a new class of ferroptosis inhibitors together with the therapeutic effect in an ischemic stroke model［J］. European Journal of Medicinal Chemistry，2021，209：112842.

[17] SCHEFF S W， SAUCIER D A， CAIN M E. A statistical method for analyzing rating scale data：The BBB locomotor score［J］. Journal of Neurotrauma，2002，19（10）：1251-1260.

[18] VORONOVA O， ZHURAVKOV S， KOROTKOVA E，et al. Antioxidant properties of new phenothiazine derivatives［J］. Antioxidants，2022，11（7）：1371.

[19] MIOTTO G， ROSSETTO M， DI PAOLO M L，et al. Insight into the mechanism of ferroptosis inhibition by ferrostatin-1［J］. Redox Biology，2020，28：101328.

基金资助

国家自然科学基金(82560280)

陕西省科学技术厅一般项目(2024SF-YBXM-037)