微小RNA-200a&c在改善广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎中的作用

摘要

【目的】探讨过表达miRNA-200a&c后对广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎的保护作用。【方法】选取2～3周SPF级Balb/c小鼠分成4组，即正常组，广州管圆线虫感染7 d、14 d、21 d组。分别记录不同时间分组小鼠的体质量及其生存情况，并对小鼠进行神经行为学评分及视觉评分。视觉诱发电位（VEP）检测不同时间分组小鼠视觉损伤情况。透射电镜观察不同时间分组小鼠眼球组织结构变化。广州管圆线虫感染第7天时通过立体定位注射向小鼠侧脑室注射miRNA-200a&c外源性类似物，同时将小鼠分为正常组，广州管圆线虫感染21 d组、广州管圆线虫感染+阴性对照（NC）组、广州管圆线虫感染+过表达miRNA-200a&c类似物组。VEP检测以上分组小鼠视觉损伤情况。透射电镜观察以上分组小鼠眼球组织结构变化。免疫荧光检测以上分组小鼠眼部视网膜神经节细胞（RGCs）及视神经少突胶质细胞（OLs）的数量变化。【结果】广州管圆线虫感染第21天，部分Balb/c小鼠眼睑完全闭合（32.52±4.67）%或出现眼球萎缩（15.79±3.23）%等现象，同时出现小鼠体质量下降（21 dpi:P<0.05）和神志不清等表现，感染21 d组小鼠神经行为学评分明显降低，转棒实验时长缩短68%(21 dpi:P<0.01)，部分小鼠出现偏瘫而无法正常行走，甚至部分出现行动迟缓、共济失调、定向障碍；另外有部分小鼠出现刺激感觉反应迟钝，单侧视力缺失，视动反应阈值下降83%，视觉功能明显下降（21 dpi:P<0.05）。VEP结果显示广州管圆线虫感染21 d时Balb/c小鼠潜伏期与正常组相比轻度延长（21 dpi:P<0.05），且多为单侧眼部发病。过表达miRNA-200a&c后，与感染21 d组相比，VEP检测结果显示，P1波潜伏期明显缩短（P<0.05）；透射电镜结显示视网膜神经节细胞胞质肿胀情况较感染21 d组对比有所减轻，视神经髓鞘结构较感染21 d组对比相对紧密，厚度也较均匀（P<0.05）；免疫荧光结果显示RGCs和OLs数量较感染21 d组相比细胞数量明显升高且细胞排列紊乱的现象也有所改善（P<0.05）。【结论】广州管圆线虫感染Balb/c小鼠后引起脱髓鞘性视神经炎，过表达miRNA-200a&c可减轻脱髓鞘性视神经炎造成的损伤，改善小鼠眼部损伤。

关键词

miRNA-200a / miRNA-200c / 脱髓鞘性视神经炎 / 视网膜神经节细胞 / 少突胶质细胞