新冠非结构蛋白nsp9细胞定位及其与宿主蛋白互作分析

张倡珲; 代玉涵; 王应归; 王美林; 赵一洋

doi:10.15983/j.cnki.jsnu.2025208

陕西师范大学学报（自然科学版） ›› 2025, Vol. 53 ›› Issue (03) : 94 -101. DOI: 10.15983/j.cnki.jsnu.2025208

新冠非结构蛋白nsp9细胞定位及其与宿主蛋白互作分析

张倡珲, 代玉涵, 王应归, 王美林, 赵一洋

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摘要

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)对人类健康及社会经济结构造成了深远且严重的冲击，剖析该病毒复制机制的核心环节对制定有效的SARS-CoV-2防控策略尤为重要。新冠非结构蛋白nsp9是一种关键单链核酸结合蛋白，在病毒生命循环中扮演着举足轻重的角色。通过在细胞中过表达融合绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的nsp9,再利用激光共聚焦显微镜观察发现，nsp9主要定位于细胞核。采用免疫沉淀联合质谱分析初步鉴定出nsp9与包括YWHAB、TRAF2在内的多个细胞内蛋白存在相互作用，并利用免疫共沉淀及pull-down实验进行了验证。此外，通过CCK8细胞活力检测、EdU细胞增殖实验以及TUNEL细胞凋亡实验等方式探究nsp9对宿主细胞生物学特性的潜在影响，发现nsp9过表达并不能显著影响细胞正常增殖或诱导细胞凋亡。研究结果为后续深入探究nsp9与宿主蛋白的互作关系及其在SARS-CoV-2感染中的分子机制提供了一定参考。