基于Box-Behnken设计优化毛菊苣药渣粗多糖酶法提取工艺

摘要

为了实现新疆特色植物药毛菊苣的药渣中有效成分毛菊苣粗多糖的高效提取与合理利用,采用响应面法优化了毛菊苣药渣粗多糖提取工艺条件,对提取得到的毛菊苣粗多糖运用液相色谱示差折光检测法（HPLC-RID）鉴定果糖和葡萄糖的含量,最后考察其体外抗氧化活性。以毛菊苣根醇提后的药渣为原料,毛菊苣粗多糖得率为考察指标,提取温度、提取时间、料液比及酶量为主要影响因素,在单因素试验的基础上,采用响应面法对毛菊苣药渣粗多糖提取工艺进行优化,运用国标检测方法HPLC-RID鉴定毛菊苣粗多糖中果糖和葡萄糖两种单糖的含量,通过)1, 1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl radical,DPPH和2, 2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑林-6-磺硫(2, 2'-azino-bis（3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid）,ABTS)对毛菊苣粗多糖的体外抗氧化活性进行考察。响应面试验法对毛菊苣药渣粗多糖进行优化的最优方案是提取时间2.0 h,酶量2.0%,料液比1∶40(g·mL^-1),提取温度51℃,毛菊苣药渣使用该条件进行提取多糖的得率为（20.64±0.34）%,HPLC-RID法在乙腈∶水（75∶25,V∶V）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃条件下能够实现高效分离鉴定,体外抗氧化试验表明毛菊苣粗多糖对。DPPH自由基和ABTS自由基都有较好的清除作用本研究获得了毛菊苣药渣粗多糖酶法的最佳提取工艺,并鉴定出毛菊苣粗多糖中果糖和葡萄糖两种单糖成分,且证明了毛菊苣药渣粗多糖具有良好的体外抗氧化活性。

关键词

毛菊苣药渣粗多糖 / 提取 / 响应面 / 液相色谱示差折光检测法 / 抗氧化