iPSC-MSCs联合HMB和D-核糖缓解地塞米松诱导的C2C12肌管细胞萎缩

摘要

目的：探讨诱导多能干细胞来源的间充质干细胞（iPSC-MSCs）与β-羟基-β-甲基丁酸（HMB）和D-核糖（DR）联合使用在肌管细胞萎缩中的作用及机制。方法：以C2C12细胞系为研究对象，利用地塞米松（Dex）建立体外肌萎缩模型，分别设置对照组，Dex组，iPSC-MSCs、HMB和DR单独及联合组。采用CCK8法检测细胞活力，HE染色法观察肌管形态，免疫印迹法和免疫荧光法对其机制进行研究。结果：与Dex组比较，iPSC-MSCs+HMB+DR+Dex组显著增加C2C12肌管细胞活力(^***P<0.001)和肌管直径(^***P<0.001)。免疫印迹结果显示，iPSC-MSCs+HMB+DR+Dex组P-PKB(^**P<0.01)、P-mTOR(^**P<0.01)、PI3K（^*P<0.05）、PGC-1（^*P<0.05）、IGF-1(^**P<0.01)、MHC（^*P<0.05）、Pax-7（^*P<0.05）和MyoD-1（^*P<0.05）蛋白表达显著增加，Foxo3a(^**P<0.01)、MuRF-1（^*P<0.05）、Caspase-3（^*P<0.05）和Bax（^*P<0.05）蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值(^**P<0.01)显著降低。免疫荧光结果与免疫印迹结果相一致，即iPSC-MSCs+HMB+DR+Dex组与Dex组比较，MuRF-1蛋白表达显著降低(^***P<0.001),Pax-7蛋白表达显著增加(^***P<0.001)。结论：iPSC-MSCs联合HMB和DR可以改善Dex诱导的C2C12肌管细胞萎缩。这可能与iPSC-MSCs、HMB和DR联合使用可以激活PI3K/PKB信号通路，促进蛋白质合成；降低Bax/Bcl-2比值以及抑制Caspase-3蛋白表达从而阻止细胞凋亡；增加肌蛋白MHC、Pax-7和MyoD-1的表达有关。

关键词

肌管萎缩 / iPSC-MSCs / HMB / D-核糖 / C2C12