二味杜仲汤调控Rhoa/Rock通路防治绝经后骨质疏松症作用机制研究

摘要

目的 探讨二味杜仲汤调控Rhoa/Rock通路防治绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）的机制，探讨“补肾清热”中医理论在绝经后骨质疏松症中的应用。方法 选取6月龄SPF级健康雌性未孕SD大鼠60只，设置为假手术组、模型组、二味杜仲汤低剂量组、二味杜仲汤中剂量组、二味杜仲汤高剂量组、雌激素组。术后12周，使用双能骨密度仪（DXA）检测大鼠骨密度，假手术组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃，二味杜仲汤低、中、高剂量组分别给予二味杜仲汤低、中、高剂量药液，雌激素组给予雌激素。指标检测：DXA检测大鼠骨密度；全自动生化分析仪检测大鼠血清中钙、磷含量的变化；HE染色观察股骨的病理变化；ELISA法测定碱性磷酸酶（ALP）、血清骨钙素（BGP）、骨保护素（OPG）;Western Blot法检测骨组织中Rhoa、Rock1、Rock2的蛋白表达；Q-PCR法测定大鼠骨组织Rhoa、Rock1、Rock2 mRNA的表达。结果 与假手术组相比，模型组大鼠体质量增加明显（P<0.01），子宫系数降低显著（P<0.01）；与模型组相比，二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组体质量明显下降（P<0.01），子宫系数明显上升（P<0.05）。HE染色结果显示：与模型组相比，二味杜仲汤各剂量组和雌激素组骨微结构明显改善，骨小梁排列较为紧密，脂肪细胞减少，骨髓腔内粒细胞数量明显增多。骨密度结果显示：与模型组相比，二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组骨密度显著上升（P<0.01）；生化结果表明：与模型组相比，二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组血清钙磷含量明显升高（P<0.01）。ELISA结果显示：与模型组相比，二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组均有效降低了血清中的ALP、BGP含量（P<0.01），提高了OPG含量（P<0.01）;Western Blot结果显示：与模型组相比，二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组Rhoa、Rock1、Rock2表达明显升高（P<0.01）。Q-PCR结果显示：与模型组相比，二味杜仲汤低、中、高剂量组及雌激素组Rhoa、Rock1、Rock2表达明显升高（P<0.01）。结论 二味杜仲汤可以改善骨组织的微结构，从而改善骨密度，以改善骨质疏松。其机制可能是通过调控Rhoa/Rock信号通路，提高成骨因子Rhoa、Rock1、Rock2的表达来实现的。

关键词

二味杜仲汤 / 绝经后骨质疏松症 / Rhoa/Rock信号通路