头手足三联针法基于NrF2/SLC7A11调控铁死亡治疗大鼠缺血性脑卒中机制研究

摘要

目的 探讨头手足三联针法通过调控铁死亡治疗缺血性脑卒中大鼠的作用机制，以期为缺血性脑卒中的治疗提供新的实验理论依据。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针灸组、铁死亡抑制剂（ferrostatin-1,Fer-1）组，每组20只。采用改良Koizumi线栓法制备MCAO大鼠模型，术后第2天开始治疗。假手术组、模型组：只作抓取、固定而不治疗；针灸组：取百会透曲鬓、神庭透百会、合谷、太冲穴进行治疗；Fer-1组：每日腹腔注射1次Fer-1,2.5μmol/kg。连续治疗7 d后进行Longa神经功能评分观察大鼠自主运动状态，并采用苏木精-伊红（HE）染色检测各组大鼠大脑皮层组织形态；采用三苯基氯化四氮唑（TTC）染色检测各组大鼠脑梗死情况；透射电镜观察大鼠皮层神经元超微结构；活性氧（ROS）荧光染色检测神经活性氧水平；比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）氧化及抗氧化指标水平；Western blot检测铁死亡相关蛋白核因子E2相关因子2(NrF2)、质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达情况。结果 与假手术组比较，模型组大鼠神经功能评分、脑梗死面积、血清MDA含量明显升高（P<0.01），血清SOD活力值，GSH含量，铁死亡相关蛋白NrF2、SLC7A11、GPX4表达水平降低（P<0.01）；与模型组相比，针灸组和Fer-1组神经功能评分、脑梗死面积、血清MDA含量下降（P<0.01,P<0.05），血清SOD活力值，GSH含量，铁死亡相关蛋白NrF2、SLC7A11、GPX4表达水平升高（P<0.01,P<0.05）；与针灸组比较，Fer-1组神经功能评分、MDA含量、NrF2蛋白表达水平未见统计学差异，Fer-1组脑梗死面积，SOD含量，GSH含量，SLC7A11、GPX4蛋白表达水平变化明显（P<0.01,P<0.05）。结论 头手足三联针法对缺血性脑卒中大鼠具有神经保护作用，这可能与通过提高NrF2/SLC7A11的表达从而调控铁死亡有关。

关键词

头手足三联针法 / 缺血性脑卒中 / 铁死亡