茵陈蒿汤对MAFLD小鼠LncMEG3/miR-21-5p/PPARα介导脂肪酸β氧化的影响

摘要

目的 探讨茵陈蒿汤对代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）小鼠LncMEG3/miR-21-5p/PPARα介导脂肪酸β氧化的影响。方法 为探讨MAFLD差异表达的miRNAs，应用PubMed、Web of Science和中国知网3个电子数据库对以中英文发表的研究进行检索，采用随机效应模型进行Meta分析。24只C57BL/6J小鼠，SPF级，采用随机数字表法将小鼠随机分为对照组、模型组和茵陈蒿汤组，共3组，每组8只。采用喂饲高脂饲料的方法对模型组和茵陈蒿汤组小鼠建立MAFLD模型。12周后，茵陈蒿汤组给予茵陈蒿汤灌胃，每日1次，连续4周。采用HE染色法和油红O染色法观察各组小鼠肝组织病理形态表现；全自动生化分析仪检测血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、高密度脂蛋白胆固（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）；试剂盒检测小鼠肝脏甘油三酯（TG）和游离脂肪酸（FFA）水平；RT-qPCR法检测小鼠LncMEG3、miR-21-5p、miR-34a-5p、miR-122-5p、miR-192-5p、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)、肉碱棕榈酰基转移酶2(CPT2)、中链酰基辅酶A脱氢酶（MCAD）、长链脂酰辅酶A脱氢酶（LCAD）、酰基辅酶A氧化酶1(ACOX1)和三羟酰辅酶A脱氢酶（EHHADH）mRNA水平蛋白表达水平。结果 Meta分析结果显示，与健康对照组相比，MAFLD组miR-34a-5p、miR-122-5p、miR-192-5p、miR-21-5p、miR-451-5p水平显著升高。肝脏HE染色结果发现，模型组小鼠出现肝细胞肿胀，体积增大，有明显脂肪变性；与模型组相比，茵陈蒿汤组小鼠肝细胞体积肿胀明显降低，脂肪变性显著减少。肝脏油红O染色结果发现，与对照组相比，模型组肝脏可见大量橘红色脂滴，脂质沉积显著升高；茵陈蒿汤组可见少量脂肪变性，橘红色脂滴分布减少，肝脏脂质沉积情况明显改善。相较于对照组，模型组小鼠血清HDL-C、LDL-C、TG、TC、AST、ALT表达显著升高（P<0.05），肝脏TG和FFA水平均显著升高（P<0.05）；相较于模型组，茵陈蒿汤组小鼠肝脏FFA和TG水平显著降低（P<0.05），血清AST、LDL-C、TG、ALT水平显著降低（P<0.05）。与对照组相比，模型组miR-21-5p、miR-34a-5p、miR-122-5p、miR-192-5p表达水平增高（P<0.05）；与模型组相比，茵陈蒿汤组miR-21-5p、miR-34a-5p、miR-122-5p、miR-192-5p表达水平降低（P<0.05）,miR-21-5p变化倍数（模型组/茵陈蒿汤组）最大。与对照组相比，模型组Lnc MEG3表达水平降低（P<0.05）；与模型组相比，茵陈蒿汤组Lnc MEG3表达水平升高（P<0.05）。与对照组相比，模型组PPARα、CPT1A、CPT2、MCAD、LCAD、ACOX1、EHHADH mRNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.05）；与模型组相比，茵陈蒿汤组PPARα、CPT1A、CPT2、MCAD、LCAD、ACOX1、EHHADH mRNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。结论 茵陈蒿汤可能通过调控Lnc MEG3/miR-21-5p/PPARα信号通路促进肝脏脂肪酸β氧化，从而达到防治MAFLD的作用。

关键词

茵陈蒿汤 / 代谢相关脂肪性肝病 / 竞争性内源RNA / Lnc MEG3/miR-21-5p/PPARα / 脂肪酸β氧化

基金资助

国家自然科学基金青年科学基金项目（81803860）; 辽宁省科技厅项目（2024-MSLH-290）; 辽宁省教育厅项目（2024JH2/102600194）