温通活血乳膏通过GRP78-PERK通路对糖尿病周围神经病变大鼠雪旺细胞保护机制研究

摘要

目的 探讨温通活血乳膏对链脲佐菌素诱导的糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy,DPN）大鼠坐骨神经结构改变及雪旺细胞凋亡的影响。方法 动物实验：取90只雄性SD大鼠随机选择15只作为空白组，余75只造模成功后，将大鼠随机分为5组：模型组、温通活血乳膏高剂量组、温通活血乳膏中剂量组、基质组、二甲双胍组，连续给予温通活血乳膏外涂4周后观察各组大鼠的血糖、热甩尾时间；采用光镜、电镜分别观察大鼠坐骨神经病理变化和超微结构变化；用Western Bolt检测坐骨神经中凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2的表达水平；采取TUNEL方法对各组坐骨神经进行检测，观察各组神经细胞凋亡情况。体外实验：选用大鼠雪旺细胞RSC96，分为正常组，高糖组，低、中、高不同剂量的温通活血乳膏组，用Western Bolt及qPCR检测细胞中GRP78、PERK、CHOP、Bax、Bcl-2蛋白表达及mRNA转录水平。结果 动物实验：与空白组相比，模型组坐骨神经病理变化和超微结构发生明显改变，坐骨神经中Bax蛋白表达量升高（P>0.05）、Bcl-2蛋白表达量降低（P<0.05），雪旺细胞凋亡数量明显增加；与模型组相比，温通活血乳膏组抑制了DPN大鼠坐骨神经病理和超微结构改变，并逆转了Bax和Bcl-2蛋白表达量（P<0.05），减少了神经髓鞘中细胞凋亡。体外实验：与正常组相比，高糖组GRP78、PERK、CHOP、Bax蛋白表达水平及mRNA转录水平均升高，Bcl-2蛋白表达水平及mRNA转录水平降低（P<0.05）；与高糖组相比，温通活血乳膏干预后其表达水平均有不同程度逆转（P<0.05）。结论 温通活血乳膏通过GRP78-PERK通路抑制糖尿病周围神经病变大鼠的雪旺细胞凋亡，保护周围神经髓鞘的完整性，从而改善DPN大鼠周围神经结构的损伤。

关键词

温通活血乳膏 / 糖尿病周围神经病变 / 大鼠 / 细胞 / 凋亡