生骨再造丸对激素性股骨头坏死大鼠血清相关炎性细胞因子表达水平的影响

摘要

目的 探讨生骨再造丸治疗早期激素性股骨头坏死（SONFH）的可能作用靶点，验证生骨再造丸治疗早期SONFH的临床疗效。方法 实验以雄性SD大鼠为研究对象，随机抽取15只大鼠作为空白对照组（NC组），实验组75只采用脂多糖联合糖皮质激素（GC）肌肉注射建立早期SONFH大鼠模型。从中随机抽取8只大鼠采用空气栓塞法处死并取出双侧股骨头标本制作病理切片，证实早期SONFH造模成功，然后进行分组。将剩余的SONFH大鼠模型按照随机数字表法分为5组：激素模型组（Model组）11只，生骨再造丸高剂量组（SGZZ-H组）、生骨再造丸中剂量组（SGZZ-M组）、生骨再造丸低剂量组（SGZZ-L组）各10只，阳性对照组（JGSW组）11只。按照预先的实验设计进行药物灌胃治疗，灌胃期间密切观察并记录各组SD大鼠一般情况的变化，直至给药第8周末治疗结束后2 h，各组大鼠称重、取血，离心后分离血清并在-20℃保存。采用空气栓塞法处死大鼠，无菌条件下用手术剪及手术刀取出双侧的股骨头标本，剔除软骨，生理盐水漂洗，滤纸拭干，称重完成后左侧股骨头标本迅速放入液氮中速冻过夜后转移至-80℃冰箱保存，采用ELISA法检测大鼠血清相关炎性细胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）、血清碱性磷酸酶（ALP）、血清钙（S-Ca）、血清磷（S-P）、骨钙素（BGP）、降钙素（CT）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）等骨代谢相关指标的含量。结果 （1）大鼠行为学观察：经生骨再造丸灌胃治疗至第8周末，SGZZ-H组、SGZZ-M组、SGZZ-L组与JGSW组较Model组精神状况、活动量、饮食饮水、后肢肌力及跛行状况均有不同程度改善，其中以SGZZ-H组和JGSW组症状改善更加明显，但较NC组未恢复正常。（2）股骨头标本形态学观察：Model组股骨头明显出现皲裂、缺损且血运较差，有骨质疏松、坏死的表现，SGZZ-H组、SGZZ-M组、SGZZ-L组与JGSW组较Model组均有不同程度改观。（3）ELISA试验检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α、ALP、S-Ca、S-P、BGP、CT和TRACP指标水平：Model组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、ALP、CT和TRACP表达水平相对NC组均明显升高（P<0.001）,Model组大鼠血清S-Ca、S-P和BGP表达水平相对NC组均明显下降（P<0.001），且各治疗组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、S-Ca、S-P、BGP、ALP、CT和TRACP表达水平相对Model组均有不同程度改善，其中以SGZZ-H组、SGZZ-M组及JGSW组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、ALP、CT和TRACP表达水平降低最为明显（P<0.01）,SGZZ-H组及JGSW组大鼠血清S-Ca、S-P、BGP表达水平升高最为明显（P<0.001）。SGZZ-H组与JGSW组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、S-Ca、S-P、BGP、ALP、CT和TRACP表达水平比较差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 （1）该实验证明采用脂多糖联合GC肌肉注射可以成功诱导SD大鼠早期SONFH的发生。（2）生骨再造丸可通过抑制IL-1β、IL-6、TNF-α、ALP、CT和TRACP的表达，促进S-Ca、S-P和BGP的表达，改善骨代谢，防治早期SONFH。

关键词

生骨再造丸 / 激素性股骨头坏死 / 炎性因子