补阳还五汤调控AMPK/NLRP3信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤作用机制

摘要

目的 观察补阳还五汤对心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）大鼠的影响，明确补阳还五汤调控AMPK/NLRP3信号通路减轻MIRI的作用机制。方法 将40只大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MIRI）、补阳还五汤组（BYHWD）、补阳还五汤+AMPK抑制剂组（BYHWD+CC），各组给予相应剂量药物或0.9%氯化钠溶液7 d，末次给药25 min后开始造模，Sham组大鼠只暴露冠状动脉不结扎，其余组大鼠采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立MIRI大鼠模型。采用TTC染色观察心肌梗死面积；HE染色观察心肌组织病理变化；免疫荧光检测心肌细胞焦亡炎性因子的表达情况；Western blot检测心肌组织AMPK、p-AMPK、NLRP3、pro-caspase1、cleaved-caspase1的蛋白表达水平。结果 Sham组无心肌梗死，无炎细胞浸润，心肌组织形态结构正常；与Sham组比较，MIRI组、BYHWD+CC组心肌梗死面积显著增加（P<0.01），可见炎细胞浸润，心肌纤维排列紊乱、断裂，心肌细胞焦亡炎性因子NLRP3、cleaved-caspase1荧光强度显著增强（P<0.05）,p-AMPK/AMPK蛋白表达降低（P<0.05）,NLRP3、cleaved/pro-caspase1蛋白表达升高（P<0.05）；与MIRI组比较，BYHWD组心肌梗死面积缩小（P<0.05），心肌细胞焦亡炎性因子NLRP3、cleaved-caspase1荧光强度降低（P<0.05）,p-AMPK/AMPK蛋白表达升高（P<0.05）,NLRP3、cleaved/pro-caspase1蛋白表达降低（P<0.05）；与BYHWD组比较，BYHWD+CC组心肌梗死面积增大（P<0.01），心肌细胞焦亡炎性因子NLRP3、cleaved-caspase1荧光强度增强（P<0.05）,p-AMPK/AMPK蛋白表达降低（P<0.05）,NLRP3、cleaved/pro-caspase1蛋白表达升高（P<0.05）。结论 补阳还五汤可以有效改善MIRI，其作用机制可能与激活AMPK、抑制NLRP3炎症小体介导的炎症反应及细胞焦亡有关。

关键词

心肌缺血再灌注损伤 / 补阳还五汤 / 细胞焦亡 / AMPK/NLRP3信号通路 / 益气活血