大黄素保护葡聚糖硫酸钠所致斑马鱼溃疡性结肠炎作用研究

摘要

目的 建立葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium salt,DSS）诱导的溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）斑马鱼模型，评价大黄素抗UC作用。方法 将绿色荧光标记中性粒细胞Tg(mpo:GFP)系斑马鱼浸泡于不同浓度的DSS溶液中，给药3 d后观察斑马鱼的死亡情况，确定使用0.6%DSS进行后续实验。将野生斑马鱼随机分为空白对照组、模型对照组、大黄素组（125 nmol/L）及泼尼松龙组（250μg/mL）。除空白对照组外，其余各组浸泡于0.6%DSS胚胎培养水中诱导UC模型，荧光显微镜下观察各组斑马鱼肠道中性粒细胞表达；苏木精-伊红染色观察肠道组织病理变化；阿尔新蓝染色观察杯状细胞数量变化，实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,q-PCR)检测斑马鱼体内肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的mRNA水平。结果 与空白对照组相比，模型对照组斑马鱼肠道内中性粒细胞数量显著增加（P<0.001）；肠道病理组织损伤较严重；肠道杯状细胞数量降低（P<0.001）；体内TNF-α和IL-1β mRNA表达显著增加（P<0.001）,IL-10 mRNA表达降低（P<0.05）。与模型对照组相比，大黄素组斑马鱼肠道内中性粒细胞数量显著降低（P<0.001）；肠道组织病理损伤得到改善；肠道杯状细胞数量增加（P<0.05）；体内TNF-α和IL-1β mRNA表达显著下调（P<0.001）,IL-10 mRNA表达上调（P<0.001）。结论 大黄素对UC有保护作用，其作用机制可能与通过抑制中性粒细胞募集，改善肠道组织病理学改变，增加杯状细胞数量，降低TNF-α和IL-1β mRNA水平，提高IL-10 mRNA表达有关。

关键词

大黄素 / 斑马鱼 / 溃疡性结肠炎 / 炎症