鼓室内注射川芎嗪改善顺铂诱导耳毒性大鼠模型作用机制研究

摘要

目的 探讨鼓室内注射川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）干预顺铂诱导耳毒性大鼠模型的作用机制。方法 实验大鼠分为空白组对照组（B组）、空白+鼓室注射TMP组（B+L组）、模型对照组（M组）、模型+鼓室注射TMP组（M+L组）。听性脑干反应检测大鼠听力变化；耳蜗基底膜铺片检测大鼠耳蜗毛细胞的病理改变；比色法检测大鼠血清中一氧化氮（nitric oxide,NO）、过氧化氢（hydrogen peroxide,H₂O₂）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性；Western blot法检测大鼠耳蜗组织中细胞质核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、细胞核Nrf2、血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS）蛋白表达；RT-qPCR法检测大鼠耳蜗组织中Nrf2、HO-1和γ-GCS mRNA水平。结果 与B组比较，M组大鼠听力阈值升高，毛细胞缺失，血清中NO含量降低，H₂O₂、MDA含量升高，抗氧化酶活性降低，耳蜗组织细胞质中Nrf2蛋白表达增高，细胞核中Nrf2、HO-1、γ-GCS蛋白表达显著降低（P<0.05）；与M组比较，M+L组大鼠听力阈值降低，毛细胞损失减轻，血清中NO含量增高，H₂O₂、MDA含量降低，抗氧化酶活性增高，耳蜗组织细胞质中Nrf2蛋白表达降低，细胞核中Nrf 2、HO-1、γ-GCS蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论 鼓室内注射TMP可以通过调控Nrf2/抗氧化反应元件（antioxidant response element,ARE）信号通路，促进Nrf2核转移，增加HO-1、γ-GCS蛋白的表达，从而减轻顺铂诱导的耳毒性。

关键词

川芎嗪 / 顺铂 / 耳毒性 / Nrf2/ARE信号通路 / 氧化应激