基于NOX4/ROS/NF-κB通路探讨补阳还五汤对Dahl盐敏感性大鼠高血压肾损伤的保护机制

摘要

目的 通过观察研究补阳还五汤对Dahl盐敏感大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/活性氧/促使核转录因子-кB(NOX4/ROS/NF-κB)信号转导通路的影响，探讨补阳还五汤对Dahl盐敏感性大鼠高血压肾损伤的保护机制。方法 7周龄Dahl盐敏感大鼠60只，分为正常组，模型组，补阳还五汤低、中、高剂量组和氢氯噻嗪共6组，每组10只。所有大鼠于SPF级动物实验中心适应性饲养7 d，均给予普通饲料。随后进入实验阶段，正常组每日采用低盐饲料喂养（NaCl含量0.3%饲料），其余各组采用高盐饲料喂养（NaCl含量8%）,7 d后开始药物干预，补阳还五汤低、中、高剂量组按成人和大鼠给药量换算，每100 g大鼠每日给药量分别为0.275、0.55、1.1 g，氢氯噻嗪组每100 g大鼠每日给药量为1 mg。造模期间，每隔7 d定时检测大鼠收缩压。高盐饲养35 d后检测到模型组大鼠收缩压显著升高，病理组织学观察发现模型组大鼠肾脏损伤明显，则说明Dahl盐敏感性大鼠高血压肾损伤模型造模成功。随后取各组大鼠肾脏进行检测，采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠肾脏中过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）以及ROS表达含量；HE染色观察大鼠肾脏病理学变化；荧光定量PCR检测大鼠肾脏中NOX4、p47phox、NF-кB、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的mRNA表达，Western blot检测大鼠肾脏中NOX4、p47phox、NF-κB、IL-6、TNF-α蛋白表达。结果 与模型组大鼠相比补阳还五汤中、高剂量组大鼠收缩压下降明显（P<0.05）；肾脏中CAT、SOD含量显著升高（P<0.05）,MDA、ROS显著降低（P<0.05）;HE染色结果显示，补阳还五汤中、高剂量组大鼠肾组织形态较模型组明显改善；NOX4、p47phox、NF-κB、IL-6、TNF-αmRNA表达和蛋白表达均降低（P<0.05）。结论 补阳还五汤可能是通过调节NOX4/ROS/NF-κB通路相关信号分子的表达，抑制氧化应激与炎症反应，从而起到保护Dahl盐敏感性大鼠高血压肾损伤的作用。

关键词

补阳还五汤 / Dahl盐敏感性大鼠 / 高血压肾损伤 / 氧化应激 / 炎症反应