平喘宁调节PI3K信号通路干预寒哮大鼠肺组织气道炎症机制

摘要

目的 探讨平喘宁基于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）调控相关信号分子表达，对于卵清蛋白（OVA）致敏诱导的寒哮大鼠模型肺组织气道炎症的作用机制。方法 将105只健康雄性SD大鼠随机分为7组，分别为正常组、模型组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组、桂龙咳喘宁组、地塞米松组，每组15只。在寒冷环境下，以OVA对除正常组之外的其他组大鼠进行致敏，以建立模型。造模成功后，每日予以正常组和模型组等体积0.9%氯化钠溶液，平喘宁高、中、低剂量组分别予以平喘宁汤剂14.578、7.289、3.645 g/（kg·d）灌胃给药，桂龙咳喘宁组、地塞米松组分别予以桂龙咳喘宁片溶于0.9%氯化钠溶液的药液0.405 g/（kg·d）、地塞米松片溶于0.9%氯化钠溶液的药液0.405 mg/（kg·d）灌胃给药。采用苏木素-伊红（HE）染色法观察各组大鼠肺组织病理变化；酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素（IL）-13、IL-25水平；反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测NADPH氧化酶4(NOX4)mRNA、维甲酸诱导基因Ⅰ（RIG-I）mRNA、胶原蛋白VⅠ（Col6）m RNA的表达水平。在整个实验过程中，对大鼠一般行为学状况进行观察和记录。结果 HE染色法可见相较于正常组，模型组大鼠肺组织的平滑肌增生，有明显炎性细胞浸润，管壁增厚；相较于模型组，各治疗组大鼠肺组织病理情况均有改善。ELISA法可见相较于正常组，模型组大鼠BALF中IL-13、IL-25表达上升（P<0.01）；相较于模型组，平喘宁高、中、低剂量组的IL-13、IL-25表达差异均有统计学意义（P<0.01）。RT-PCR法可见相较于正常组，模型组大鼠肺组织中NOX4、RIG-I、Col6 mRNA表达差异均有统计学意义（P<0.01）；相较于模型组，各治疗组差异均有统计学意义（P<0.01）。大鼠一般行为学状况观察可见相较于正常组，模型组大鼠形体消瘦，皮毛枯槁，扎堆聚集，呼吸急促，打喷嚏，可闻及哮鸣声；相较于模型组，用药后各治疗组在呼吸频率、活动状态、哮鸣声响、皮毛情况等各方面均有改善。结论 平喘宁通过调节PI3K信号通路中NOX4、RIG-I、Col6的表达减轻寒哮大鼠气道炎症。

关键词

支气管哮喘 / 平喘宁 / PI3K / NOX4 / RIG-I / Col6

基金资助

安徽省高校学科（专业）拔尖人才学术资助项目（gxbjZD2021054）; 安徽省教育厅自然科学重大项目（KJ2021ZD0064）