消瘀泄浊饮中活性成分鉴定以及HPLC法测定其中5种关键成分

摘要

目的 利用高效液相色谱联合质谱技术鉴定消瘀泄浊饮中的活性成分，并利用HPLC法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素、杯苋甾酮、苦杏仁苷这5种成分的含量。方法 采用液质联用技术测定消瘀泄浊饮中的生物活性成分，色谱柱：Waters HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)，流动相为0.1%甲酸-水溶液→0.1%甲酸-乙腈-异丙醇，梯度洗脱；流速：0.3 mL/min；柱温：40℃。高分辨质谱：鞘气40 Arb；辅助气10 Arb；离子喷雾电压3000 V/-2800 V；温度350℃；离子传输管温度320℃；扫描模式为Full-scan MS2模式。采用Progenesis QI进行基线过滤、峰识别、积分、保留时间校正、峰对齐，对比公共数据库和实验室自建数据库后得到消瘀泄浊饮中的生物活性成分。选择Sharpsil-U C18色谱柱；流动相为甲醇→超纯水；梯度洗脱；流速：1.0 mL/min；柱温：30℃；进样量：10μL；检测波长：210 nm（苦杏仁苷、杯苋甾酮），260 nm（毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素）。结果 从消瘀泄浊饮中共找到276种生物活性成分，其中负离子模式下找到119种，正离子模式下找到157种。选择毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素、杯苋甾酮、苦杏仁苷为消瘀泄浊饮的指标成分。各成分均能有效检出，分离度良好，阴性无干扰；5种成分在测定的进样浓度范围内与峰面积线性关系良好；平均加样回收率为99.94%～101.07%;RSD为0.78%～2.27%。结论 液质联用技术可以有效鉴定消瘀泄浊饮中的生物活性成分，所建立的HPLC法稳定性好，特异性强，可以为消瘀泄浊饮的质量控制和评价提供参考依据。

关键词

消瘀泄浊饮 / 高效液相色谱 / 高分辨质谱 / 成分鉴定 / 含量测定

基金资助

国家自然科学基金项目（82104759,82204999,82274432）; 浙江省基础公益研究计划自然科学基金探索项目（LQ22H270002）