鳖甲煎丸含药血清通过miR-140调控肝癌干细胞增殖能力及干性的机制研究

摘要

目的 研究miR-140在肝癌干细胞（liver cancer stem cells,LCSCs）中的生物学功能，以及鳖甲煎丸含药血清抑制肝癌干细胞特性的干预效应。方法 以人肝癌细胞株（Huh7）为研究对象，无血清培养基分选法分选LCSCs，用流式细胞仪鉴定富集的LCSCs，并转染miR-140慢病毒。分为Cin组、Control组、BJJP组、miR-140 mimics NC组、miR-140 mimics组、BJJP+miR-140 inhibitor组。用CCK-8法测定细胞增殖能力，RTPCR检测miR-140、CD133、CD24、EpCAM、AFP表达，Western blot法检测CD133、CD144、EpCAM、AFP蛋白表达。结果 检测显示Con组与Control组细胞增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的蛋白及RNA表达无统计学意义（P>0.05）；与miR-140 mimics NC组相比，miR-140 mimics组的肝癌干细胞的增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的RNA及蛋白表达水平均明显减少（P<0.01），但miR-140表达明显增强（P<0.05）；与Control组相比，BJJP组和BJJP+miR-140 inhibitor组的细胞增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的RNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.01），且BJJP组的细胞增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的RNA及蛋白表达水平低于BJJP+miR-140inhibitor组（均P<0.05）。结论 鳖甲煎丸能抑制LCSCs的增殖能力及干性，其机制可能通过上调miR-140的表达发挥作用。

关键词

鳖甲煎丸 / 肝癌干细胞 / miR-140 / 表面标志物