中药复方益糖康对db/db小鼠小肠肠道屏障损伤的修复作用及机制探讨

摘要

目的 观察中药复方益糖康对db/db小鼠小肠炎症的抑制作用及小肠黏膜损伤的修复作用并探讨其作用机制。方法 将24只db/db小鼠随机分为模型组（db/db组）、益糖康组（YTK组）以及阳性药（选用利拉鲁肽Liraglutide）对照组（Liraglutide组），另选择8只C57BL/6J小鼠为对照组（Con组）。YTK组小鼠予以益糖康煎剂灌胃30 g·kg^-1·d^-1,Liraglutide组每日腹腔注射利拉鲁肽200μg·kg^-1·d^-1,Con组和db/db组给予等量蒸馏水灌胃，给药时间共计5周。药物处理5周后，对小鼠禁食12 h，取小鼠尾尖血进行血糖检测，之后进行动物取材和组织分离。用ELISA检测白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）表达；免疫荧光法检测Occludin、F4/80、CD86、CD206表达；Western blot检测法检测小肠Occludin、ZO-1、TNF-α蛋白表达。结果 与Con组相比，db/db组小鼠血糖明显升高（P<0.05），与db/db组相比，Liraglutide组与YTK组血糖明显下降（P<0.05）。与db/db组相比，Liraglutide组与YTK组Occludin和ZO-1表达较明显增强（P<0.05）;Western blot结果显示Occludin蛋白表达与免疫荧光趋势一致（P<0.05）；与Con组相比，db/db组小鼠血清炎症因子IL-6与IL-1β均明显升高（P<0.05）,Liraglutide组与YTK组较db/db组明显下降（P<0.05）；与Con组比较，db/db小鼠小肠黏膜及黏膜下层IL-1β、IL-6表达量明显增强（P<0.05），而Liraglutide组与YTK组呈中度表达，较db/db组明显减弱（P<0.05）。western blot结果显示，TNF-α表达与免疫荧光趋势一致；Liraglutide组与YTK组F4/80的表达较db/db组明显减弱（P<0.05）;CD86和CD206在Con组小鼠小肠表达较弱；在db/db组表达明显增强（P<0.05），其中CD86表达更为显著，而Liraglutide组与YTK组明显改善（P<0.05）。结论 中药复方益糖康可以下调F4/80、CD86和CD206等巨噬细胞相关蛋白的表达，缓解小肠巨噬细胞聚集和活化，下调小肠IL-Iβ、IL-6和TNF-α等炎症因子，上调肠通道蛋白Occludin和ZO-1表达，修复db/db小鼠小肠黏膜损伤。

关键词

糖尿病 / 小肠炎症 / 巨噬细胞 / 益糖康 / 肠道屏障