基于NLRP3/Caspase-1细胞焦亡通路研究金匮肾气丸治疗慢性肾衰竭大鼠的疗效机制

摘要

目的 以NOD样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like protein3,NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)细胞焦亡通路为切入点，研究金匮肾气丸改善慢性肾衰竭大鼠的疗效机制。方法 将80只7周龄雄性Wistar大鼠以随机的方式抽取正常组和假手术组各20只，其中正常组不行手术干预，假手术组仅行手术剥离双肾被膜；40只造模组大鼠依据文献方法行5/6肾切除术制备慢性肾衰竭模型，4周后将造模组造模成功并存活的34只大鼠随机平均分为金匮肾气丸组17只及模型组17只。其中金匮肾气丸组予金匮肾气丸药液，正常组、假手术组及模型组予等量生理盐水进行灌胃56 d。期间观察大鼠一般情况。第57天取材检测大鼠的红细胞（red blood cell,RBC）、血红蛋白（hemoglobin,Hb）、血清肌酐（serum creatinine,Scr）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）值。并测定左肾组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白[apoptosis-associated speck-like protein containing caspase recruitment domain(CARD),ASC]、Caspase-1、白细胞介素（interleukin,IL）-18及IL-1β的mRNA及蛋白含量表达情况及肾组织病理形态。结果 正常组和假手术组大鼠各项指标无明显差别（P>0.05）。金匮肾气丸组大鼠的RBC、Hb水平相对模型组显著升高（P<0.05）。金匮肾气丸组大鼠的Scr、BUN水平相对模型组显著降低（P<0.05）。金匮肾气丸组大鼠相对于模型组大鼠NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β的mRNA和蛋白表达含量则显著降低（P<0.05），光学显微镜及透射电镜观察显示：正常组及假手术组结构形态正常。金匮肾气丸组大鼠病变程度明显轻于模型组大鼠。结论 金匮肾气丸可明显改善CRF大鼠的贫血状态、肾功能情况，升高RBC、Hb水平，降低Scr、BUN水平。金匮肾气丸可明显减轻慢性肾衰竭大鼠炎症反应情况，延缓肾衰竭进展。金匮肾气丸延缓慢性肾衰竭进展的机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1细胞焦亡信号通路，下调NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达有关。

关键词

金匮肾气丸 / 慢性肾衰竭 / NLRP3/Caspase-1细胞焦亡通路