补阳还五汤促进自噬抑制H₂O₂诱导的人脐静脉内皮细胞衰老机制研究

摘要

目的 观察补阳还五汤（BYHW）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的衰老内皮细胞沉默信息调节因子1（silent information regulator 1,SIRT1）-自噬通路的作用。方法 以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为研究对象，H₂O₂诱导的内皮细胞作为模型，体外培养HUVECs，并将细胞分为正常组、模型组（H₂O₂ 400μmol/L）、BYHW组（H₂O₂400μmol/L+BYHW 2500μg/m L）。衰老相关β半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色检测细胞衰老，蛋白质免疫印迹法检测SIRT1、纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）、泛素结合蛋白p62及微管相关蛋白1轻链3β（LC3）蛋白的表达，ELISA法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量，免疫荧光观察SIRT1、LC3的表达。结果 400μmol/L的H₂O₂处理可成功诱导HUVECs衰老。与正常组相比，衰老模型组中SA-β-Gal阳染率增加，SIRT1、LC3蛋白表达降低，SOD含量降低，PAI-1、p62蛋白表达升高，MDA含量升高，细胞免疫荧光显示SIRT1、LC3表达降低。与模型组比较，BYHW组细胞蓝染比率降低，PAI-1、p62蛋白表达降低，SOD水平升高，SIRT1、LC3蛋白表达升高，细胞免疫荧光BYHW组SIRT1、LC3表达明显升高。结论 在过氧化氢诱导的HUVECs衰老模型中，补阳还五汤能够上调SIRT1，激活自噬，从而对衰老的内皮细胞起到保护作用。

关键词

衰老 / 内皮细胞 / 补阳还五汤 / SIRT1 / 自噬

基金资助

国家自然科学基金面上项目（82174114）; 沈阳市科学技术局公共卫生研发专项（医工结合协同创新研究项目）（22-321-32-14）; 辽宁中医药大学附属医院育苗工程项目（YM202133）