人参-五味子药对对PCPA失眠大鼠神经递质及cAMP/Epac/Raf1信号通路的作用机制研究

摘要

目的 通过观察人参-五味子药对对失眠大鼠下丘脑中神经递质及其cAMP/Epac/Raf1信号通路水平的影响，探讨人参-五味子药对对PCPA失眠大鼠的作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、地西泮组、人参-五味子低剂量组、中剂量组和高剂量组，每组10只。除空白组外，其余5组连续3 d对大鼠进行腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）复制失眠模型。模型复制成功后，人参-五味子药对低、中、高剂量组给药浓度分别为0.3、0.9、2.7 g/mL，地西泮组给药浓度为0.002 g/mL，模型组、空白组每天生理盐水灌胃，各组每日灌胃2 mL，连续给药14 d。观察记录各组大鼠的行为学变化；采用HE（苏木素-伊红）染色法检测大鼠下丘脑组织病理形态的改变；ELISA（酶联免疫吸附法）测定大鼠下丘脑中甘丙肽（GAL）、去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）、腺苷（Ado）水平；RT-PCR（实时荧光定量聚合酶链式反应）检测大鼠下丘脑中Eapc、Raf1mRNA的表达；IHC（免疫组织化学染色法）检测大鼠下丘脑中cAMP蛋白的含量。结果 和空白组相比：模型组大鼠下丘脑病理切片损伤明显；GAL、5-HT、Ado含量显著下降（P<0.05）,NE含量显著上升（P<0.05），下丘脑Eapc、Raf1 mRNA表达显著下降（P<0.05），下丘脑cAMP蛋白表达显著下降（P<0.05），差异有统计学意义。与模型组相比：地西泮组、人参-五味子低、中、高剂量组下丘脑病理切片损伤明显改善；地西泮组、人参-五味子中、高剂量组GAL、5-HT、Ado含量显著上升（P<0.05）,NE含量显著下降（P<0.05），下丘脑Eapc、Raf1 mRNA表达显著上升（P<0.05），下丘脑cAMP蛋白表达显著上升（P<0.05），差异有统计学意义。结论 人参-五味子药对可能通过上调cAMP/Epac/Raf1信号通路，缓解PCPA大鼠失眠症状。

关键词

人参-五味子药对 / cAMP/Epac/Raf1信号通路 / 失眠 / 作用机制