双启动子过表达蔗糖转化酶Suc2酿酒酵母菌株的构建

摘要

为了提高蔗糖转化酶Suc2在酿酒酵母中的表达水平，本研究利用串联双启动子联合启动Suc2基因表达，构建高效菊糖基乙醇的生产菌株。首先构建含有串联磷酸甘油酸激酶组成型强启动子PGK1p的Suc2重组表达载体pYC230-DP-mSuc2,电击转化至酿酒酵母BY4741中，成功构建重组菌BY-DP。经实时荧光定量PCR、高效气相色谱和摇瓶培养验证，证明了在含15%菊糖的培养基中发酵48 h后，重组菌BY-DP具有更高的Suc2基因转录水平、酶活以及乙醇产量，与含单个PGK1p启动子的对照重组菌BY-mS相比，分别提高了30.0%、18.6%和25.3%。实验通过构建串联双PGK1p启动子，有效强化了Suc2的表达，提高了重组菌发酵菊糖生产乙醇能力。

关键词

酿酒酵母 / 蔗糖转化酶 / 双启动子 / 菊糖 / 乙醇