产L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌的构建及优化

张艳芳; 王晓茹; 张一帆; 张春枝

doi:10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2024.0404

大连工业大学学报 ›› 2024, Vol. 43 ›› Issue (04) : 257 -260. DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2024.0404

产L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌的构建及优化

张艳芳, 王晓茹, 张一帆, 张春枝

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摘要

L-阿拉伯糖异构酶（L-AI）可专一性的作用于底物D-半乳糖，生成D-塔格糖。为获得高产L-AI的菌株，将来源于短乳杆菌L.brevis sp. D-tag 1的L-AI编码基因araA基因连接到pET-30a（+）表达质粒中构建重组质粒，并将重组质粒通过热激法转入E.coli BL21（DE3）,构建得到基因工程菌E.coli BL21（DE3）/pET-30a（+）-araA。根据宿主大肠杆菌的密码子偏好性，对araA基因进行密码子优化，并将优化的araA_o基因连接到pET-30a（+）表达质粒中构建重组质粒，采用相同的方法构建得到基因工程菌E.coli BL21（DE3）/pET-30a（+）-araA_o。结果表明，在相同培养条件下，优化后的菌株较未优化的表达量有明显提高，酶活提高了79.2%。