纤维素酶CxGH7A在枯草芽孢杆菌中的分泌表达与酶学性质

摘要

实验室早期从一株纤维素降解菌Arthrobotrys sp.CX1中获得了纤维素酶CxGH7A基因并构建毕赤酵母重组菌株pPICZαA-CxGH7A/X-33。但酵母发酵表达外源蛋白周期较长，经济成本高。为实现CxGH7A的高效外源表达，本研究构建了重组质粒pHT43-CxGH7A,并转入枯草芽孢杆菌WB600中，获得枯草芽孢杆菌重组菌pHT43-CxGH7A/WB600,对其酶学性质进行表征并对发酵条件进行优化。结果表明，重组菌pHT43-CxGH7A/WB600表达后胞外分泌液在55 ku处有差异蛋白条带，酶活力达到47.25 U/mL。优化后，重组菌在TB培养基、pH 7.0、诱导温度30℃、诱导剂浓度0.5 mmol/L、诱导时间36 h条件下，上清液中的酶活力达到123.73 U/mL,且枯草芽孢杆菌表达系统生产CxGH7A的效益达到毕赤酵母表达系统的4.6倍。

关键词

纤维素酶 / 枯草芽孢杆菌 / 毕赤酵母 / 酶学性质