来自Neopestalotiopsis clavispora糖苷水解酶的表达及表征

薛嘉懿; 张凡星; 覃杰; 尹恒; 赵秒

doi:10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2024.6004

大连工业大学学报 ›› 2025, Vol. 44 ›› Issue (04) : 276 -282. DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2024.6004

来自Neopestalotiopsis clavispora糖苷水解酶的表达及表征

薛嘉懿, 张凡星, 覃杰, 尹恒, 赵秒

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摘要

从新拟盘多毛孢菌(Neopestalotiopsis clavispora)中克隆了一种糖苷水解酶(命名为NcGHA)并在大肠杆菌中表达。Ni-NTA柱纯化SDS-PAGE检测结果显示，NcGHA的分子质量为40 ku,与理论分子质量相符。DNS法检测产物中还原糖发现，NcGHA可能对聚半乳糖醛酸有水解活性，其比活力为5.45 U/g,并且在pH 6.0和50℃时活性最佳。质谱检测显示产物中单糖的相对信号强度为2.21,表明NcGHA可能是一种外切聚半乳糖醛酸酶。通过分子对接，发现该酶的催化位点可能是Glu117与Asp75。