利用定点突变技术提高β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的葡萄糖耐受性

荆晓凤; 王梓懿; 陈晓艺; 李宪臻

doi:10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2025.0102

大连工业大学学报 ›› 2025, Vol. 44 ›› Issue (01) : 8 -13. DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2025.0102

利用定点突变技术提高β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的葡萄糖耐受性

荆晓凤, 王梓懿, 陈晓艺, 李宪臻

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摘要

为提高β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的葡萄糖耐受性，利用定点突变技术，将该酶氨基酸序列中的第188、309和452位色氨酸分别突变为丙氨酸，结果发现，突变体W309A的葡萄糖耐受性有明显增高。对W309位点进行饱和突变，结果表明，突变体W309E和W309N的葡萄糖耐受性较天然蛋白提高了20倍。在商品纤维素酶与W309E和W309N最适质量比1∶1条件下，协同程度比原始蛋白也有所提高，DoS值分别提高了14.8%和8.6%,底物转化率分别提高了4.1%和10.1%。通过定点突变技术对β-葡萄糖苷酶SmBgl3A进行了改造，获得了葡萄糖耐受性显著提高的两个突变体蛋白。