海胆免疫因子Trf在光棘球海胆体腔细胞的表达及其对免疫功能的影响

摘要

合成了多肽抗原并偶联血蓝蛋白载体，利用免疫小鼠制备了Trf多克隆抗体，应用酶联免疫吸附法测定了抗体的效价。利用蛋白免疫印迹技术和间接免疫荧光检测分析了光棘球海胆体腔细胞Trf蛋白的表达，LPS免疫刺激后光棘球海胆体腔细胞Trf蛋白表达量增加，体腔液中Trf蛋白表达谱也出现明显变化，Trf阳性细胞比例显著增加，由对照组(4.20±0.26)%增加到(11.26±2.38)%。EdU增殖实验结合间接免疫荧光分析发现，LPS免疫刺激后随着增殖细胞比例由(2.22±1.62)%增加到(13.59±3.57)%;Trf阳性细胞的比例也显著增加，由(15.78±4.91)%增加到(32.02±3.31)%。利用Protein A+G琼脂糖凝胶对制备抗体进行纯化，纯化后的Trf抗体进行抗体阻断实验，结果发现在体外吞噬实验中，Trf抗体孵育可以显著抑制体腔细胞对灿烂弧菌的吞噬能力。体内吞噬实验结果显示，Trf抗体阻断后，无论有无LPS刺激，体腔细胞吞噬率均显著降低，提示Trf抗体对体腔细胞的吞噬能力具有拮抗作用。

关键词

海胆免疫因子 / 多克隆抗体 / 体腔细胞 / 吞噬能力