优化表达谷氨酸脱羧酶高效制备γ-氨基丁酸

谭琛, 崔曦文, 齐佳琨, 张春枝

大连工业大学学报 ›› 2026, Vol. 45 ›› Issue (3) : 163 -168.

大连工业大学学报 ›› 2026, Vol. 45 ›› Issue (3) : 163 -168. DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2026.0302

优化表达谷氨酸脱羧酶高效制备γ-氨基丁酸

    谭琛, 崔曦文, 齐佳琨, 张春枝
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摘要

谷氨酸脱羧酶(GAD)可催化L-谷氨酸(L-Glu)脱羧生成GABA。为获得GAD高产菌株,克隆了Lactobacillus brevis NM-2的gadB基因并进行密码子优化,以pET-30a(+)为表达载体,构建了重组菌株E.coli BL21(DE3)/pET-30a(+)-gadB°。SDS-PAGE电泳及酶活力测定结果表明,经IPTG诱导,该菌株成功实现GAD的可溶性表达。在0.05 mmol/L磷酸吡哆醛、加酶量10 U/g底物、pH 4.6、40℃最优催化条件下反应13 h,该酶可将600 g/L L-Glu转化为GABA,转化率达99.6%,生产效率为32.2 g/(L·h)。

关键词

谷氨酸脱羧酶 / γ-氨基丁酸 / 密码子优化 / 酶转化

Key words

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谭琛, 崔曦文, 齐佳琨, 张春枝. 优化表达谷氨酸脱羧酶高效制备γ-氨基丁酸[J]. 大连工业大学学报, 2026, 45(3): 163-168 DOI:10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2026.0302

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