基于ferritin纳米载体的抑制素α亚基的多克隆抗体的制备

摘要

为了制备高效价和多动物适用性的抑制素α (inhibin α, INH-α)多克隆抗体，通过生物信息学分析INH-α物种同源保守性，并以pET-32α为骨架，构建INH-α和INH-α-Ferritin表达载体，原核表达纯化后的重组蛋白用于免疫日本大耳兔，采用间接ELISA方法测定兔血清中抗体效价。结果表明，本研究成功构建了INH-α和INH-α-Ferritin原核表达载体，在0.4 mmol/L IPTG、 37℃诱导6 h的条件下，分别获得了35 kDa和50 kDa包涵体形式的重组蛋白。通过免疫获得了高效价的兔抗多克隆抗体，INH-α-Ferritin抗血清效价达到1∶19 531 250。生物信息学分析结果显示INH-α在哺乳动物间的同源性高、保守性强。本研究成功构建INH-α和INH-α-Ferritin原核表达载体，并通过INH-α-Ferritin显著提高多克隆抗体的效价，为提高哺乳动物家畜繁殖力的研究奠定基础。

关键词

抑制素α / 生物信息学 / 原核表达 / 多克隆抗体