尾巨桉良种无性系DH32-28高效植株再生体系的建立

韦利达; 刘正兴; 梁康明; 吴永富; 林凯; 蒋兴成; 吴雯霏; 黎明慧; 胥佳静; 徐增富

doi:10.13417/j.gab.043.001353

基因组学与应用生物学 ›› 2024, Vol. 43 ›› Issue (08) : 1353 -1363. DOI: 10.13417/j.gab.043.001353

尾巨桉良种无性系DH32-28高效植株再生体系的建立

韦利达, 刘正兴, 梁康明, 吴永富, 林凯, 蒋兴成, 吴雯霏, 黎明慧, 胥佳静, 徐增富

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摘要

本研究以尾巨桉（Eucalyptus urophylla×E.grandis）三种良种无性系DH32-26、 DH32-28和DH32-29的无菌增殖苗为实验材料，旨在探讨植物生长调节剂对增殖苗节间伸长和植株再生的影响，并进一步研究了无性系、植株类型和外植体类型对植株再生能力的影响。此外，还以易再生无性系DH32-28为材料，进一步研究植物生长调节剂和愈伤组织诱导时间对再生的影响。结果表明，无性系是影响尾巨桉离体再生的主要因素，DH32-28的再生效率显著高于DH32-26和DH32-29的；GA₃或IBA处理后增殖苗的节间均能显著伸长，其中GA₃处理获得的DH32-28伸长苗的芽再生率最高，并且再生芽个数最多；不同外植体类型的芽再生率差异显著，其中DH32-28伸长苗茎段芽再生率最高，其次是叶柄和叶片。最适宜DH32-28离体植株再生的条件为：增殖苗经过GA₃处理20 d后的伸长苗节间茎段作为外植体，最适宜的愈伤组织培养基为：1/2 MS+0.22 mg/L TDZ+0.019 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂，诱导时间为20 d;最适宜的再生芽诱导培养基为：1/2 MS+0.25 mg/L 6-BA+0.125 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂，诱导30 d的芽再生率达95.00%;在根诱导培养基（1/2 MS+0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂）上再生芽均可生根。本研究成功建立了尾巨桉良种无性系DH32-28茎段高效植株再生体系，为进一步的遗传转化体系建立及后续基因功能和基因工程等研究奠定了基础。