大叶栎SSR引物开发及育种群体指纹图谱构建

摘要

本研究基于大叶栎(Castanopsis fissa)转录组信息，开发大叶栎SSR分子标记，筛选及验证所开发SSR分子标记的有效性及多态性，对广西梧州大叶栎育种群体进行遗传多样性分析并构建指纹图谱。通过对大叶栎叶片的转录组测序结果进行分析，共挖掘到128 275个SSR位点，其中单核苷酸重复类型SSR位点占总位点的比例最高，为57.03%。通过引物设计和实验筛选，共计开发出225对SSR引物，有效扩增率为63.56%,最终筛选出扩增稳定、条带清晰的引物20对。用该组引物对广西大叶栎育种群体的79个样本进行遗传多样性分析。结果表明，该群体观测等位基因数(observed number of alleles,Na)、有效等位基因数(effective number of alleles,Ne)、 Shannon多样性指数(Shannon′s diversity index,I)、观测杂合度(observed heterozygosity,Ho)变化范围分别为2.000～5.000、 1.163～2.838、 0.266～1.092和0.150～0.763,平均值分别为2.850、 1.810、 0.690和0.425。优选其中8对SSR引物构建育种群体的指纹图谱，可以实现对广西梧州大叶栎育种群体每个无性系的准确鉴定。综上认为，所开发的20对SSR引物可以满足开展大叶栎群体遗传学研究的需要，所构建的大叶栎育种群体指纹图谱为优良无性系分子鉴定和子代亲本分析提供了可靠的技术手段。

关键词

大叶栎 / SSR分子标记 / 遗传多样性 / 指纹图谱