YBX1基因肠道特异性敲低小鼠模型的建立

摘要

Y-盒结合蛋白1（Y-box binding protein 1, YBX1）是冷休克蛋白超家族的成员，由YBX1基因编码。YBX1在机体多个组织中高度表达，参与多种生理功能的调节。然而目前YBX1在肠道中的作用尚不清楚。本研究先用CCK-8法在细胞水平上检测过表达/抑制YBX1基因对猪（Sus scrofa）肠上皮细胞IPEC-J2、大鼠（Rattus norvegicus）肠上皮细胞IEC-6增殖的影响。然后利用Cre-loxP基因敲除系统，构建YBX1基因肠道特异性敲低小鼠（Mus musculus）模型。通过YBX1^flox/flox小鼠与PVillin-Cre^+/-小鼠杂交繁育获得子代小鼠。利用PCR方法鉴定小鼠基因型，采用实时定量PCR技术（real-time quantitative PCR, RT-qPCR）和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测YBX1基因肠道特异性敲低小鼠和对照小鼠YBX1的表达情况，验证基因敲低的效率。结果表明，过表达/抑制YBX1基因不影响细胞增殖，模型小鼠YBX1的mRNA水平下降为对照鼠的62%,蛋白水平下降为对照鼠的63%,证明YBX1基因肠道特异性敲低小鼠构建成功，为深入研究YBX1在肠道中的功能和作用机制提供稳定可靠的动物模型。

关键词

YBX1基因 / 肠道组织特异性敲低 / C57BL/6J小鼠