过表达cyp19a对青鳉(Oryzias latipes)性腺发育的影响

摘要

cyp19a基因编码的芳香化酶是一个重要的类固醇合成酶，能够促进雄激素向雌激素转化，影响动物卵巢的正常生理功能。在许多鱼类中，敲除cyp19a基因会导致雌鱼性逆转为雄鱼，但过表达cyp19a基因能否促进雄鱼逆转为雌鱼仍不清楚。本研究通过构建cyp19a转基因青鳉(Oryzias latipes)Tg(EFa1:olcyp19a),从DNA、 RNA、蛋白水平的表达及组织形态学等层面探讨过表达cyp19a基因对青鳉性腺发育的影响。本研究构建了pBOS-cyp19a真核表达载体并将其显微注射入青鳉胚胎，通过PCR筛选对插入拷贝数和蛋白水平进行分析，成功获得了两个具有不同拷贝数的cyp19a转基因品系。RT-qPCR结果显示，转基因雌鱼卵巢中cyp19a mRNA的表达量显著增加，雄鱼精巢中的表达量也显著升高，超过了野生型雌鱼卵巢中的水平。然而，转基因雄鱼精巢中与精巢发育相关的基因dmrt1、gsdf、tex9、myb和sycp2的表达无显著变化。此外，转基因的XY雄鱼未出现性逆转，其繁殖能力与对照组相比无显著差异。综上所述，单独过表达cyp19a不足以促进青鳉发生由雄性向雌性的性逆转，表明cyp19a是雌性卵巢发育的必要因素，但并非决定性因素。

关键词

青鳉(Oryzias latipes) / cyp19a / 转基因 / 性腺发育