藤黄酚对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的抑制作用

摘要

本研究旨在探讨藤黄酚（garcinol, Gar）对小鼠（Mus musculus）脾淋巴细胞的免疫抑制作用及其潜在机制。本研究采用不同剂量（2、 4、 6、 8、 10μmol/L）的Gar作用于刀豆蛋白A（concanavalin A, Con A）诱导的小鼠脾淋巴细胞，采用CCK-8法评估脾淋巴细胞活力，采用流式细胞术测定脾淋巴细胞中CD4⁺、 CD8⁺ T细胞的比例，采用ELISA法检测细胞上清液中细胞因子IL-2、 IFN-γ及IL-4的含量，采用钙调蛋白磷酸酶（calcineurin, CaN）活性检测试剂盒检测细胞内CaN的活力。此外，运用免疫荧光染色法观察细胞NFAT蛋白核易位情况，并通过Western blot检测细胞NFAT、 p65、 IκBα、 p-p65、 p-IκBα的蛋白水平。结果显示，Gar在非细胞毒性的浓度下能显著抑制Con A诱导的脾淋巴细胞增殖，其半抑制浓度(half inhibitory concentration,IC₅₀)为7.05μmol/L。此外，Gar可剂量依赖性降低Con A诱导的脾淋巴细胞中CD4⁺ T细胞的比例和IL-2、 IFN-γ、 IL-4的分泌水平，降低CaN酶活力和NFAT、 p-p65、 p-IκBα的蛋白水平，并抑制NFAT核易位。本研究发现Gar能抑制Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌，其作用机制可能与抑制CaN/NFAT和NF-κB信号通路有关。

关键词

藤黄酚 / T淋巴细胞增殖 / 免疫抑制剂 / CaN/NFAT / NF-κB