基因原位回补技术及其在囊状匍柄霉中的应用

doi:10.13417/j.gab.044.000297

基因组学与应用生物学 ›› 2025, Vol. 44 ›› Issue (03) : 297 -308. DOI: 10.13417/j.gab.044.000297

邓心怡, 曹俊杰, 周倩

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摘要

囊状匍柄霉(Stemphylium vesicarium)是无性态真菌中的重要类群，在世界范围内广泛存在，可危害多种作物，造成严重经济损失。前期研究发现，一种主要协同转运蛋白超家族(major facilitator superfamily, MFS)基因SvMFS1敲除后，突变株表型变化明显，载体回补后表型却并未完全恢复。本研究基于Split-marker技术建立了敲除基因原位回补技术，通过比较载体回补转化子和原位回补转化子的表型、目的基因表达量、致病性及毒素Altersolanol A产量，发现原位回补是一种优于载体回补的基因功能研究技术。该方法将敲除基因重新重组至染色体原来的位置，能更好地回补敲除突变体丧失的表型，弥补了载体回补在丝状真菌功能基因研究中的不足，为敲除基因回补提供了一种新的方法。