基于荧光蛋白的植物可变剪切报告系统的构建

唐茜; 聂奕; 王文慧; 陈雨晴; 魏济帆; 黄予; 陈怡君; 刘柯颍; 蔡文国

doi:10.13417/j.gab.044.000443

基因组学与应用生物学 ›› 2025, Vol. 44 ›› Issue (05) : 443 -454. DOI: 10.13417/j.gab.044.000443

基于荧光蛋白的植物可变剪切报告系统的构建

唐茜, 聂奕, 王文慧, 陈雨晴, 魏济帆, 黄予, 陈怡君, 刘柯颍, 蔡文国

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摘要

内含子剪切是真核生物转录后修饰重要环节,是重要的基因表达调控方式。植物中多数基因存在可变剪切,能形成不同的剪切形式。然而对植物可变剪切因子的研究尚待深入。在本文的报告系统中,编码绿色荧光蛋白的基因中间插入了一个含有终止密码子的内含子以中断荧光蛋白的表达,而当内含子被正确剪切时能表达出绿色荧光蛋白。通过在本氏烟草(Nicotiana benthamiana)中进行瞬时表达实验,该系统可对植物可变剪切的效率进行定性与定量评估。此报告系统的建立为研究剪切辅助因子与特定前体mRNA的直接调控关系提供了新工具,同时也为快速筛选和研究剪切因子修饰对剪切过程的影响提供了便捷手段,有望进一步深化对可变剪切因子的认识。