鳖甲煎丸抑制肝癌细胞的环状RNA表达谱分析

摘要

本研究主要探讨环状RNA(circular RNA, circRNA)在鳖甲煎丸抑制肝癌进展过程中的表达变化及分子机制。利用find＿circ和CIRI算法、 KEGG通路和GSEA富集分析,对circRNA的表达及特征进行深入研究。采用彗星实验检测鳖甲煎丸含药血清对肝癌细胞DNA损伤的影响;通过β-半乳糖苷酶染色评估其对肝癌细胞衰老的诱导作用;采用划痕实验检测细胞迁移能力的变化。此外,还构建了肝癌细胞皮下移植动物模型,并观察了瘤体体积和生长曲线的变化。共鉴定出1 764个差异表达的circRNA,其靶基因主要富集于自噬-动物、脊髓小脑共济失调、内质网中的蛋白质加工和细胞衰老等信号通路。GSEA分析进一步显示,这些circRNA的靶基因在UV响应DN、有丝分裂纺锤体和G2M检查点通路中显著富集。彗星实验结果表明,鳖甲煎丸含药血清可显著诱导肝癌细胞的DNA损伤(P<0.01); β-半乳糖苷酶染色实验显示,经干预后的衰老肝癌细胞数量显著增加(P<0.001)。划痕实验结果表明,经干预后的肝癌细胞迁移能力在48 h时被显著抑制(P<0.000 1)。小鼠皮下瘤模型实验结果显示,经鳖甲煎丸灌胃后的肿瘤体积明显减小,生长曲线显著降低(P<0.000 1)。综合以上结果,鳖甲煎丸通过调控circRNA的表达、诱导肝癌细胞的衰老进而抑制肝癌细胞的迁移和增殖以发挥抗肝癌作用。

关键词

鳖甲煎丸 / 环状RNA(circRNA) / 肝癌 / 细胞衰老